基因组DNA快速提取及在转基因大豆检测中的应用

S565.1%Q943.2; 基因组DNA的提取是DNA分子水平研究和检测的重要环节.为补充完善现场检测方法,根据硅膜吸附DNA的特性,结合过滤膜和注射器,开发一种现场快速提取植物基因组DNA的方法.选取大豆、棉花、油菜、玉米、水稻5种主要作物的叶片和种子为样品提取DNA,利用PCR和普通重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase am-plification,RPA)对快速提取和QIAGNE试剂盒提取的DNA进行内源基因的扩增.结果显示,快速方法不需要离心机,现场3分钟完成DNA提取;在DNA得率上要高于QIAGEN方法,但在DNA纯度上低于QIAGEN方法.不过两种方法...

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Published in中国油料作物学报 Vol. 43; no. 1; pp. 70 - 76
Main Authors 陈欲, 汪小福, 陈笑芸, 彭城, 徐俊锋, 李玥莹
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 沈阳师范大学生命科学学院,辽宁沈阳,110034%农产品质量安全危害因子与风险防控国家重点实验室,浙江省农业科学院,浙江杭州,310021 2021
Subjects
DNA快速提取
转基因检测
基因组
现场检测
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ISSN1007-9084
DOI10.19802/j.issn.1007-9084.2020301

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Summary:S565.1%Q943.2; 基因组DNA的提取是DNA分子水平研究和检测的重要环节.为补充完善现场检测方法,根据硅膜吸附DNA的特性,结合过滤膜和注射器,开发一种现场快速提取植物基因组DNA的方法.选取大豆、棉花、油菜、玉米、水稻5种主要作物的叶片和种子为样品提取DNA,利用PCR和普通重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase am-plification,RPA)对快速提取和QIAGNE试剂盒提取的DNA进行内源基因的扩增.结果显示,快速方法不需要离心机,现场3分钟完成DNA提取;在DNA得率上要高于QIAGEN方法,但在DNA纯度上低于QIAGEN方法.不过两种方法提取的DNA都能满足PCR和RPA的需要.利用DNA快速提取方法结合普通PCR、荧光RPA和荧光定量PCR对转基因大豆SHZD32-1进行实际检测,3种方法的检测结果一致,均能准确检出大豆SHZD32-1的转基因成分.
ISSN:1007-9084
DOI:10.19802/j.issn.1007-9084.2020301