HNE诱导下PKCδ/θ-Duox1-ROS对气道黏液高分泌影响的体外实验研究

R562.11; 目的:探讨蛋白激酶C(PKC)δ/θ-双重功能氧化酶1(Duox1)-活性氧(ROS)信号通路对人气道黏蛋白(MUC)5AC的调控作用及机制,为气道黏液高分泌治疗提供新靶点.方法:PKC及其亚基PKCδ/θ抑制剂、Duox1抑制剂或自由基清除剂DMTU预处理人气道上皮细胞16HBE,给予人中性粒细胞弹性蛋白酶(HNE)刺激建立体外气道炎症细胞模型.试剂盒测定各组细胞ROS生成水平,实时荧光定量PCR检测Duox1和MUC5AC mRNA水平,Western blot测定各组细胞干扰因素对Duox1蛋白水平的影响,ELISA和免疫荧光检测各组细胞MUC5AC蛋白表达.结果:与对...

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Published in中国免疫学杂志 Vol. 40; no. 10; pp. 2042 - 2051
Main Authors 何明欣, 杨雅楼, 徐立, 杨雨菡, 张紫薇, 周向东, 李琪
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 海南医科大学第一附属医院呼吸内科,海口 570102 2024
北京大学深圳医院重症医学科,深圳 518036%海南省呼吸疾病中心,海口 570102%海南省呼吸疾病中心,海口 570102
Subjects
蛋白激酶Cδ/θ
黏蛋白5AC
Dual oxidase-1
Reactive oxygen species
双重功能氧化酶1
活性氧
Protein kinase Cδ/θ
MUC5AC
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ISSN1000-484X
DOI10.3969/j.issn.1000-484X.2024.10.004

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Summary:R562.11; 目的:探讨蛋白激酶C(PKC)δ/θ-双重功能氧化酶1(Duox1)-活性氧(ROS)信号通路对人气道黏蛋白(MUC)5AC的调控作用及机制,为气道黏液高分泌治疗提供新靶点.方法:PKC及其亚基PKCδ/θ抑制剂、Duox1抑制剂或自由基清除剂DMTU预处理人气道上皮细胞16HBE,给予人中性粒细胞弹性蛋白酶(HNE)刺激建立体外气道炎症细胞模型.试剂盒测定各组细胞ROS生成水平,实时荧光定量PCR检测Duox1和MUC5AC mRNA水平,Western blot测定各组细胞干扰因素对Duox1蛋白水平的影响,ELISA和免疫荧光检测各组细胞MUC5AC蛋白表达.结果:与对照组相比,HNE组ROS生成明显增多,Duox1、MUC5AC mRNA和蛋白表达增加(P<0.05);给予Duox1抑制剂、自由基清除剂或PKC抑制剂及PKCδ/θ抑制剂后,ROS生成受到明显抑制,Duox1和MUC5AC mRNA及蛋白表达减少(P<0.05);给予PKCα/β后,ROS生成、Duox1和MUC5AC mRNA及蛋白表达与HNE组比较无明显变化(P>0.05).结论:体外细胞模型实验中,HNE可通过PKCδ/θ-Duox1-ROS介导MUC5AC高表达,在气道黏液高分泌发展过程中起重要作用.
ISSN:1000-484X
DOI:10.3969/j.issn.1000-484X.2024.10.004