骨细胞 Wnt/β-Catenin 通过 Notch 信号促进 BMSCs 成骨分化

R68; 目的 探讨骨细胞Wnt信号通路对骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的作用及其分子机制.方法 采用条件性基因敲出Cre/loxp技术制备特异性激活骨细胞Wnt/β-Catenin信号通路的小鼠;体外分离其和野生对照组小鼠的骨细胞,并分别与野生型小鼠骨髓间充质干细胞共培养;碱性磷酸酶(ALP)染色及活性定量、茜素红( Alizarin red)染色检测共培养早期成骨分化和晚期钙盐沉积; Real-Time PCR 检测骨细胞 Notch 信号配体 Jag1、 Jag2、 Dll1、 Dll4 及共培养后成骨分化特异标志物Runx2、ALP、Osteocalcin的mRNA表达水平.随...

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Published in中国骨质疏松杂志 Vol. 24; no. 5; pp. 600 - 605
Main Authors 任磊, 代光明, 林枭, 张东力, 田冕, 贺尧, 许文娟, 涂小林, 黄伟
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 重庆医科大学附属第一医院骨科,重庆,400016%重庆医科大学生命科学研究院骨发育与再生实验室,重庆,400016 2018
Subjects
骨细胞
Notch
骨髓间充质干细胞
Osteocytes
成骨分化
Osteogenic differentiation
Wnt/β-Catenin
BMSCs
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ISSN1006-7108
DOI10.3969/j.issn.1006-7108.2018.05.008

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Summary:R68; 目的 探讨骨细胞Wnt信号通路对骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的作用及其分子机制.方法 采用条件性基因敲出Cre/loxp技术制备特异性激活骨细胞Wnt/β-Catenin信号通路的小鼠;体外分离其和野生对照组小鼠的骨细胞,并分别与野生型小鼠骨髓间充质干细胞共培养;碱性磷酸酶(ALP)染色及活性定量、茜素红( Alizarin red)染色检测共培养早期成骨分化和晚期钙盐沉积; Real-Time PCR 检测骨细胞 Notch 信号配体 Jag1、 Jag2、 Dll1、 Dll4 及共培养后成骨分化特异标志物Runx2、ALP、Osteocalcin的mRNA表达水平.随后于共培养中加入Notch信号通路化学抑制剂DAPT(对照组加DMSO),再次行碱性磷酸酶(ALP)染色及活性定量和Real-Time PCR检测成骨分化特异标志物表达水平.结果 Wnt/β-Catenin激活的骨细胞其自身Jag1、Jag2、Dll4 mRNA表达较对照组骨细胞明显升高(P＜0. 05),与BMSCs共培养后成骨转录因子Runx2,成骨分化特异标志物ALP、Osteocalcin mRNA的表达较野生型明显升高(P＜0. 05),钙盐沉积增加.加入DAPT后,骨细胞Wnt激活组成骨转录因子Runx2、ALP、Osteocalcin mRNA的表达明显下降(P＜0. 05).结论 骨细胞调控骨的代谢,激活其Wnt/β-Catenin信号通路将通过上调Notch信号而促进BMSCs的成骨分化.
ISSN:1006-7108
DOI:10.3969/j.issn.1006-7108.2018.05.008