纤维连接蛋白对人神经干细胞诱导分化为少突胶质前体细胞的影响

• Published in: 中国组织工程研究 Vol. 29; no. 31; pp. 6661 - 6666
• Main Authors: 汪兆艳, 王倩, 刘卫鹏, 杨辉, 栾佐, 屈素清
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 中国人民解放军总医院第六医学中心儿科,北京市 100048 2025
• Subjects: neural stem cell; cell differentiation; cell proliferation; 神经干细胞; 细胞分化; 工程化干细胞; oligodendrocyte; engineered stem cell; 纤维连接蛋白; 工程化细胞; oligodendrocyte precursor cell; 少突胶质细胞; fibronectin; 少突胶质前体细胞; engineered cell; 细胞增殖
• ISSN: 2095-4344
• DOI: 10.12307/2025.693

R459.9%R318%R322.8; 背景:少突胶质前体细胞是治疗脑白质损伤性疾病的种子细胞,建立高效稳定扩增的体外诱导分化方法是实现临床转化研究的重要前提. 目的:探讨纤维连接蛋白对人神经干细胞来源少突胶质前体细胞增殖、迁移和分化等生物学特性的影响. 方法:将悬浮培养的人神经干细胞用Accutase消化成单细胞,通过流式细胞术检测特异性标志物Nestin、Sox2、Vimentin、CD133、Musashi的表达.然后将人神经干细胞单细胞重悬于少突胶质前体细胞培养基,接种于不同质量浓度纤维连接蛋白(0,1,2.5,5,10 μg/mL)包被的6孔板中,培养7d后Accutase消化进行传代,锥虫蓝染色计数细胞,选择扩增能力最强的纤维连接蛋白包被与未用纤维连接蛋白包被的少突胶质前体细胞进行下一步实验,Transwell小室检测细胞迁移能力,流式细胞术检测Olig2、Sox10、PDGFR-α的表达.将少突胶质前体细胞向少突胶质细胞诱导分化3周,免疫荧光染色检测分化细胞Gale的表达. 结果与结论:①人神经干细胞呈悬浮球状生长,流式细胞术检测结果显示,人神经干细胞高表达Nestin、Sox2、Vimentin、CD133和Musashi;②由人神经干细胞诱导的少突胶质前体细胞的胞体为圆形或椭圆形,折光性强,有双极或三级突起结构;与0μg/mL纤维连接蛋白包被组比较,2.5,5,10 μg/mL纤维连接蛋白包被组少突胶质前体细胞的扩增能力显著增强(P＜0.05);当纤维连接蛋白质量浓度为10 μg/mL时,少突胶质前体细胞扩增能力最强;③流式细胞术检测结果显示0,10 μg/mL纤维连接蛋白包被组均高表达少突胶质前体细胞标志物Olig2、Sox10和PDGFR-α,两组无统计学差异(P＞0.05);④Transwell小室检测结果显示,与0 μg/mL纤维连接蛋白包被组比较,10 μg/mL纤维连接蛋白包被组少突胶质前体细胞的迁移能力增加(P＜0.01);⑤少突胶质前体细胞向少突胶质细胞分化3周,细胞呈多分支、网格状或膜片样复杂形态,免疫荧光染色结果显示两组少突胶质细胞Galc阳性率无统计学差异(P＞0.05).结果表明,纤维连接蛋白质量浓度为10 μg/mL时对少突胶质前体细胞的增殖和迁移作用最强,但不影响少突胶质前体细胞特异性标志物Olig2、Sox10和PDGFR-α的表达及其向少突胶质细胞的分化.