石菖蒲挥发油纤维素酶辅助提取工艺优化及抑制GABA-T活性成分研究

目的:打开制约中药中GABA-T配体快速筛选方法的瓶颈.方法:建立中空纤维配体垂钓方法筛选石菖蒲挥发油中γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-T)抑制成分.在响应面法优化石菖蒲挥发油酶辅助提取工艺基础上,将GABA-T溶液注射入中空纤维的管腔中,作为"诱饵"垂钓出石菖蒲挥发油中的潜在活性成分,并验证其GABA-T抑制活性.结果:石菖蒲挥发油的最佳提取工艺为纤维素酶添加量3 165 U/g、酶解时间1.8 h、酶解温度45 ℃,此时石菖蒲挥发油收率可达到2.56％,最终鉴定出51个化合物,主要包括烯烃、醇类、醚类、酮类、酚类、酸类等.将3 mg/mL的GABA-T溶液注射入U型中空纤...

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Published in食品与机械 Vol. 40; no. 5; pp. 146 - 153
Main Authors 方成维, 麻秀萍, 陈亮, 李倩
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 贵州中医药大学,贵州贵阳 550025 2024
Subjects
Acorus tatarinowii
配体垂钓
GABA transaminase
中空纤维
γ-氨基丁酸转氨酶
ligand fishing
hollow fiber
石菖蒲
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ISSN1003-5788
DOI10.13652/j.spjx.1003.5788.2023.80845

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Summary:目的:打开制约中药中GABA-T配体快速筛选方法的瓶颈.方法:建立中空纤维配体垂钓方法筛选石菖蒲挥发油中γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-T)抑制成分.在响应面法优化石菖蒲挥发油酶辅助提取工艺基础上,将GABA-T溶液注射入中空纤维的管腔中,作为"诱饵"垂钓出石菖蒲挥发油中的潜在活性成分,并验证其GABA-T抑制活性.结果:石菖蒲挥发油的最佳提取工艺为纤维素酶添加量3 165 U/g、酶解时间1.8 h、酶解温度45 ℃,此时石菖蒲挥发油收率可达到2.56％,最终鉴定出51个化合物,主要包括烯烃、醇类、醚类、酮类、酚类、酸类等.将3 mg/mL的GABA-T溶液注射入U型中空纤维管的空腔,共孵育160 min,封口后置于石菖蒲挥发油中进行60 kHz超声垂钓20 min,联合LCMS-IT-TOF系统进行分析,成功筛选出的α-细辛醚对GABA-T活性有浓度依赖性的抑制作用,IC5.为57.9 μg/mL.结论:建立的中空纤维配体垂钓方法稳定可行、操作简便.
ISSN:1003-5788
DOI:10.13652/j.spjx.1003.5788.2023.80845