贝类中甲肝病毒提取方法的比较

目的 对贝类甲肝病毒的3种试剂盒提取方法进行比较.方法 在贝类样品中添加不同滴度的甲肝减毒疫苗后,采用3种核酸提取法:Roche法、AM1836法、Qiagen74104法.按照其说明书提取模拟样品病毒核酸模板,从抽提效率、抽提核酸的稳定性、抑制剂去除效率3个方面对提取效果进行比较.结果 在抽提核酸稳定性、抑制剂去除效率方面,3种方法结果相同,稳定性的Ct值为24.795～28.651,抑制剂去除效率方面提取的核酸10倍稀释核酸Ct值比未稀释核酸Ct值差值均为2.9～3.2左右(F=26.802,P<0.05);在提取效率方面,Roche法高于AM1836法和Qiagen74104法,C...

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Published in食品安全质量检测学报 Vol. 11; no. 5; pp. 1573 - 1579
Main Authors 王殿夫, 田卓, 屈菲, 朱金艳, 张宏伟, 麻丽丹
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 辽东学院,丹东,118000%大连海关,大连,116000%庄河市市场监管事务服务中心,大连,116400%天津海关,天津,300000%丹东海关,丹东,118000 2020
Subjects
试剂盒
比较
提取
贝类
甲肝病毒
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ISSN2095-0381

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Summary:目的 对贝类甲肝病毒的3种试剂盒提取方法进行比较.方法 在贝类样品中添加不同滴度的甲肝减毒疫苗后,采用3种核酸提取法:Roche法、AM1836法、Qiagen74104法.按照其说明书提取模拟样品病毒核酸模板,从抽提效率、抽提核酸的稳定性、抑制剂去除效率3个方面对提取效果进行比较.结果 在抽提核酸稳定性、抑制剂去除效率方面,3种方法结果相同,稳定性的Ct值为24.795～28.651,抑制剂去除效率方面提取的核酸10倍稀释核酸Ct值比未稀释核酸Ct值差值均为2.9～3.2左右(F=26.802,P<0.05);在提取效率方面,Roche法高于AM1836法和Qiagen74104法,Ct值分别为28.5,28.7和29.0.结论 3种方法中,Roche法在贝类中甲肝病毒提取方面更有优势,可以提高贝类中甲肝病毒检测的灵敏度.
ISSN:2095-0381