鳜弹状病毒N蛋白与鳜c-Myc互作调控谷氨酰胺代谢机制

• Published in: 水产学报 Vol. 48; no. 5; pp. 54 - 62
• Main Authors: 张秋爽, 叶彩媚, 牛银杰, 林强, 梁红茹, 罗霞, 李宁求, 付小哲
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 中国水产科学研究院珠江水产研究所,农业农村部渔用药物创制重点实验室,广东省水产动物免疫与绿色养殖重点实验室,广东广州 510380 2024; 上海海洋大学水产与生命学院,上海 201306%中国水产科学研究院珠江水产研究所,农业农村部渔用药物创制重点实验室,广东省水产动物免疫与绿色养殖重点实验室,广东广州 510380
• Subjects: 蛋白互作; 谷氨酰胺代谢; glutamine metabolism; 鳜c-Myc; Siniperca chuatsi; protein interaction; 鳜; Siniperca chuatsi rhabdovirus(SCRV); 鳜弹状病毒(SCRV); Sc-c-Myc
• ISSN: 1000-0615
• DOI: 10.11964/jfc.20230614047

S942; 为了研究鳜弹状病毒(SCRV)如何调控鳜c-Myc(Sc-c-Myc)进而调控谷氨酰胺代谢的分子机制,本研究通过免疫共沉淀联合蛋白质谱寻找可能与Sc-c-Myc互作的病毒蛋白,初步分析确定为核衣壳蛋白(N蛋白);Co-IP结果显示,SCRV的N蛋白与Sc-c-Myc存在相互作用.通过PCR扩增获得了带有Flag标签序列的SCRV-N基因的ORF片段,并构建了 SCRV-N蛋白过表达载体pcDNA-N-Flag;将pcDNA-N-Flag质粒转染鳜脑组织细胞系(CPB细胞系),荧光共定位结果显示,Sc-c-Myc与SCRV-N在细胞质内存在共定位现象;通过逆转录实时定量PCR(RT-qPCR)和免疫印记(Western blot)检测转染pcDNA-N-Flag的CPB细胞系中Sc-c-Myc及谷氨酰胺代谢通路关键酶(GLS1、GDH和IDH2)的表达变化,发现Sc-c-Myc、GLS1的转录水平和蛋白水平均显著上调.综上表明,SCRV的N蛋白与Sc-c-Myc互作促进Sc-c-Myc的表达,进而调控宿主细胞谷氨酰胺代谢途径,为SCRV防控提供了新的靶点.