不结球白菜病程相关蛋白基因BcPR5的克隆及表达分析

S634.3; [目的]本文旨在研究不结球白菜病程相关蛋白基因BcPR5的结构与表达特征.[方法]通过RACE技术,从抗病品种‘苏州青’叶片克隆到BcPR5基因的全长cDNA序列.采用RT-qPCR方法分析该基因在霜霉病菌诱导,水杨酸(SA)、茉莉酸(MeJ)和脱落酸(ABA)等激素处理条件下的表达模式.SDS-PAGE技术分析该基因的原核表达特征.[结果]BcPR5基因的cDNA全长为954 bp,其中开放阅读框长度为732 bp,共编码243个氨基酸,相对分子质量为26.1×103,理论等电点是9.3.氨基酸同源系统进化分析表明,不结球白菜BcPR5基因与同属植物的进化关系相近,其中与大白...

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Published in南京农业大学学报 Vol. 41; no. 4; pp. 640 - 646
Main Authors 肖栋, 韦艳萍, 李英, 侯喜林
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室/农业农村部华东地区园艺作物生物学与种质创新重点实验室/江苏现代园艺工程技术中心,江苏南京,210095 2018
Subjects
霜霉病菌
原核表达
不结球白菜
实时定量PCR
病程相关蛋白基因(PR5)
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ISSN1000-2030
DOI10.7685/jnau.201708031

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Summary:S634.3; [目的]本文旨在研究不结球白菜病程相关蛋白基因BcPR5的结构与表达特征.[方法]通过RACE技术,从抗病品种‘苏州青’叶片克隆到BcPR5基因的全长cDNA序列.采用RT-qPCR方法分析该基因在霜霉病菌诱导,水杨酸(SA)、茉莉酸(MeJ)和脱落酸(ABA)等激素处理条件下的表达模式.SDS-PAGE技术分析该基因的原核表达特征.[结果]BcPR5基因的cDNA全长为954 bp,其中开放阅读框长度为732 bp,共编码243个氨基酸,相对分子质量为26.1×103,理论等电点是9.3.氨基酸同源系统进化分析表明,不结球白菜BcPR5基因与同属植物的进化关系相近,其中与大白菜第6号染色体上的基因同源性最高(100％).RT-qPCR分析表明,抗病品种‘苏州青’和感病品种‘矮脚黄’在霜霉病菌和非生物胁迫(SA、MeJ和ABA)诱导过程中,BcPR5基因的表达量均呈先升高后降低的趋势,且抗病品种高于感病品种.原核表达结果表明,该蛋白在终浓度为1.0 mmol·L-1的IPTG诱导4h后能实现融合蛋白的高效表达.[结论]BcPR5在不结球白菜抗霜霉病防御反应中发挥着重要作用,研究结果为该基因的功能验证提供理论基础.
ISSN:1000-2030
DOI:10.7685/jnau.201708031