PRIME EDITING-MEDIATED READTHROUGH OF PREMATURE TERMINATION CODONS (PERT)

• Main Authors: ERWOOD, Steven, LIU, David, PIERCE, Sarah, OYE, Olukeyede, RAGURAM, Aditya
• Format: Patent
• Language: English; French
• Published: 25.07.2024
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

Aspects of the disclosure relate to methods, compositions, and systems for editing an endogenous tRNA into a suppressor tRNA, or alternatively, replacing said endogenous tRNA with a suppressor tRNA with using prime editing. Additional aspects relate to compositions comprising the prime editing machinery, pegRNAs, and/or complexes comprising the prime editor and pegRNA that are capable of editing and/or replacing an endogenous tRNA to yield a suppressor tRNA. In some aspects, the disclosure further relates to polynucleotides encoding one or more nucleic acid sequences encoding the prime editor and/or pegRNA, cells comprising the polynucleotides and complexes comprising the prime editor and pegRNA, kits comprising any one of the compositions, complexes, polynucleotides, vectors, and/or cells disclosed herein, and/or delivery systems for administering any one of the compositions, complexes, polynucleotides, vectors to a subject in need thereof. Additional aspects relate to methods for inserting a new suppressor tRNA gene into a target site in a genome (e.g., a safe harbor locus site) using prime editing. Des aspects de la divulgation concernent des procédés, des compositions et des systèmes pour éditer un ARNt endogène en un ARNt suppresseur ou, en variante, remplacer ledit ARNt endogène par un ARNt suppresseur à l'aide d'une édition primaire. D'autres aspects concernent des compositions comprenant la machinerie d'édition primaire, des pegRNA, et/ou des complexes comprenant l'éditeur primaire et le pegRNA qui sont capables d'éditer et/ou de remplacer un ARNt endogène pour produire un ARNt suppresseur. Selon certains aspects, la divulgation concerne en outre des polynucléotides codant pour une ou plusieurs séquences d'acide nucléique codant pour l'éditeur primaire et/ou le pegRNA, des cellules comprenant les polynucléotides et des complexes comprenant l'éditeur primaire et le pegRNA, des kits comprenant l'un quelconque des compositions, des complexes, des polynucléotides, des vecteurs et/ou des cellules divulgués dans la présente invention, et/ou des systèmes d'administration pour administrer l'un quelconque des compositions, des complexes, des polynucléotides et des vecteurs à un sujet en ayant besoin. D'autres aspects concernent des procédés d'insertion d'un nouveau gène d'ARNt suppresseur dans un site cible dans un génome (p. ex. un site de locus d'hébergement sûr) à l'aide d'une édition primaire.