乳酸脱氢酶A在肾细胞癌中的表达及意义

目的分析乳酸脱氢酶A（LDHA）在肾细胞癌组织及细胞系中的表达情况并探讨其影响肾细胞癌细胞进展的方式。方法收集自2018年6月至2022年6月在我院通过手术方式获取的肾细胞癌组织标本52例及癌旁组织标本49例，免疫组织化学法比较LDHA的表达差异。通过qRT-PCR及Western blot实验检测LDHA在正常人近端肾小管上皮细胞系（HK-2）及肾细胞癌细胞系（A498， Caki-2， ACHN， 786-O）中的表达水平。构建LDHA-shRNA重组质粒，转染至786-O以敲低LDHA表达，利用CCK-8、克隆形成实验及EdU染色法检测敲低LDHA表达对癌细胞增殖活性的影响。利用细胞葡萄...

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Published inZhongshan da xue xue bao. Zhongshan daxue xuebao yixue kexue ban = Journal of Sun Yat-sen University. Yi xue ke xue ban Vol. 44; pp. 816 - 822
Main Authors 邱文瀚, 廖定准, 盛义雨, 熊海云, 李骏
Format Journal Article
LanguageChinese
Published Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University 01.09.2023
Subjects
肾细胞癌;乳酸脱氢酶A;细胞增殖;瓦博格效应;基因表达调控;糖酵解;乳酸生成;糖代谢
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ISSN1672-3554

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Summary:目的分析乳酸脱氢酶A（LDHA）在肾细胞癌组织及细胞系中的表达情况并探讨其影响肾细胞癌细胞进展的方式。方法收集自2018年6月至2022年6月在我院通过手术方式获取的肾细胞癌组织标本52例及癌旁组织标本49例，免疫组织化学法比较LDHA的表达差异。通过qRT-PCR及Western blot实验检测LDHA在正常人近端肾小管上皮细胞系（HK-2）及肾细胞癌细胞系（A498， Caki-2， ACHN， 786-O）中的表达水平。构建LDHA-shRNA重组质粒，转染至786-O以敲低LDHA表达，利用CCK-8、克隆形成实验及EdU染色法检测敲低LDHA表达对癌细胞增殖活性的影响。利用细胞葡萄糖摄取试验及乳酸分泌试验检测细胞糖摄取水平和乳酸分泌水平的变化。利用糖酵解压力测试实验检测细胞糖酵解能力的变化。结果免疫组化结果可见LDHA在肾细胞癌组织中表达明显高于癌旁组织，并且临床TNM分期越高的肾癌组织，LDHA的表达水平越高（P<0.05）。qRT-PCR和Western blot结果可见，LDHA在各肾细胞癌细胞系中的表达均较HK-2有明显升高（P<0.05）。在786-O敲低LDHA表达后，细胞增殖活性及糖酵解能力均显著下调（P<0.05）。结论LDHA在肾细胞癌组织及细胞中的表达均明显升高，肿瘤分期越晚期，LDHA的表达越高。抑制LDHA表达能显著抑制肾细胞癌细胞786-O的增殖活性及有氧糖酵解活性。
ISSN:1672-3554