杨树SAMT基因超表达载体的构建及遗传转化

一年生草本植物受到病原菌侵染时,体内的水杨酸甲基转移酶基因(salicylic acid methyltransferase,SAMT)能将植物侵染部位产生的水杨酸(salicylic acid,SA)转化为水杨酸甲酯(methyl salicylate,Me SA),在SA信号转导和植物系统获得抗性(systemic acquired resistance,SAR)中起着重要作用。而多年生木本植物中SAMT基因的功能还有待进一步验证。本研究根据毛果杨(Populus trichocarpa)SAMT基因序列,设计了84K杨SAMT引物,利用Gateway克隆技术,在BP反应酶作用下,使带at...

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Published in农业生物技术学报 no. 11; pp. 1709 - 1717
Main Author 董慧霞 理永霞 吕全 贾秀贞 张星耀
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 2016
Subjects
84K杨;水杨酸甲基转移酶基因(SAMT);超表达;载体构建;遗传转化
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ISSN1674-7968

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Summary:一年生草本植物受到病原菌侵染时,体内的水杨酸甲基转移酶基因(salicylic acid methyltransferase,SAMT)能将植物侵染部位产生的水杨酸(salicylic acid,SA)转化为水杨酸甲酯(methyl salicylate,Me SA),在SA信号转导和植物系统获得抗性(systemic acquired resistance,SAR)中起着重要作用。而多年生木本植物中SAMT基因的功能还有待进一步验证。本研究根据毛果杨(Populus trichocarpa)SAMT基因序列,设计了84K杨SAMT引物,利用Gateway克隆技术,在BP反应酶作用下,使带att B接头的SAMT基因全长开放阅读框与入门载体p DONRTM222进行BP重组反应,将目的基因转入入门载体;转化大肠杆菌(Escherichia coli)感受态细胞DH5α后提取的质粒用MLUⅠ进行酶切,然后在LR酶作用下与超表达载体p MDC32进行LR重组反应,将SAMT转入表达载体,成功构建了SAMT的超表达载体。通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的遗传转化,获得了SAMT超表达的84K杨转基因植株。为今后研究该基因在杨树抗溃疡病中的功能以及杨树在获得SAR和其他方面的作用提供了基础资料,同时也为研究该基因在其他多年生木本植物中的功能提供参考。
Bibliography:11-3342/S
DONG Hui-Xia;LI Yong-Xia;LV Quan;JIA Xiu-Zhen;ZHANG Xing-Yao;Key Laboratory of Forest Ecology and Environment of State Forestry Administration,Research Institute of Forest Ecology,Environmental and Protection,Chinese Academy of Forestry;College of Life Science,Henan Normal University;Research Institute of Forestry New Technology,Chinese Academy of Forestry;Co-Innovation Center for Sustainable Forestry in Southern China,Nanjing Forestry University
ISSN:1674-7968