电转条件对Cas9核糖核蛋白基因编辑效率的影响

TL99; 直接向细胞内输运CRISPR/Cas9核糖核蛋白复合物(Cas9 RNP)对于进行各种基因编辑、基因表达调控和DNA/RNA成像具有重要意义.电转是向细胞内导入Cas9 RNP的重要方法.本工作研究了电压、脉冲长度及脉冲次数等电转条件对Cas9 RNP细胞内基因编辑效率的影响,评估了不同电转条件下的细胞存活率.结果显示:电压为1300 V,脉冲次数为1,脉冲宽度为30 ms时,Cas9 RNP具有较高的基因编辑效率且生物安全性较好.本工作为CRISPR/Cas9复合物进一步的生物医学应用提供了指导依据....

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Published in核技术 Vol. 41; no. 8; pp. 77 - 81
Main Authors 夏凯, 韩玲, 孔华庭, 闫庆龙, 张瑜, 诸颖
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 中国科学院上海应用物理研究所 物理生物学研究室 中国科学院微观界面物理与探测重点实验室上海同步辐射光源生物成像中心 嘉定园区 上海 201800 10.08.2018
中国科学院大学 北京 100049%中国科学院上海应用物理研究所 熔盐化学与工程技术部 嘉定园区 上海 201800%中国科学院上海应用物理研究所 物理生物学研究室 中国科学院微观界面物理与探测重点实验室上海同步辐射光源生物成像中心 嘉定园区 上海 201800
Subjects
电转条件
生物相容性
直接输运
Cas9 核糖核蛋白(Cas9 RNP)
编辑效率
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ISSN0253-3219
DOI10.11889/j.0253-3219.2018.hjs.41.080502

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Summary:TL99; 直接向细胞内输运CRISPR/Cas9核糖核蛋白复合物(Cas9 RNP)对于进行各种基因编辑、基因表达调控和DNA/RNA成像具有重要意义.电转是向细胞内导入Cas9 RNP的重要方法.本工作研究了电压、脉冲长度及脉冲次数等电转条件对Cas9 RNP细胞内基因编辑效率的影响,评估了不同电转条件下的细胞存活率.结果显示:电压为1300 V,脉冲次数为1,脉冲宽度为30 ms时,Cas9 RNP具有较高的基因编辑效率且生物安全性较好.本工作为CRISPR/Cas9复合物进一步的生物医学应用提供了指导依据.
ISSN:0253-3219
DOI:10.11889/j.0253-3219.2018.hjs.41.080502