α-倒捻子素对肌萎缩侧索硬化的作用及其机制

• Published in: 上海交通大学学报（医学版） Vol. 42; no. 9; pp. 1265 - 1274
• Main Authors: 王大元, 徐见容, 江淦, 宋清香, 陈钧, 宋华华, 谷晓, 高小玲
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 上海交通大学医学院药理学与化学生物学系,上海200025%复旦大学药学院,上海201203 01.09.2022
• Subjects: α-倒捻子素; 能量平衡; 超氧化物歧化酶1; AMP活化蛋白激酶; 肌萎缩侧索硬化; 小胶质细胞
• ISSN: 1674-8115
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2022.09.013

R966; 目的·探究α-倒捻子素(α-mangostin,AM)对超氧化物歧化酶1(superoxide dismutase 1,SOD1)突变型肌萎缩侧索硬化(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)的干预作用及可能的机制.方法·通过试剂盒检测小胶质细胞ATP水平变化,探究AM对SOD1聚集体处理的小胶质细胞(SOD1-ALS小胶质细胞模型)能量平衡的调控作用.通过Western blotting检测AMP活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)及其代谢调节通路中关键分子肝脏激酶B1和PPARγ协同激活因子-1α的激活水平,探究AM对疾病状态小胶质细胞AMPK通路的调控作用.通过化合物C抑制AMPK激活后检测ATP变化,探究AMPK在AM调控疾病状态小胶质细胞能量平衡中的作用.抑制AMPK激活的同时通过ELISA检测SOD1-ALS小胶质细胞对SOD1的摄取率和降解率,探究AMPK介导的能量调控在AM调节SOD1-ALS小胶质细胞清除SOD1中的作用.通过Western blotting和免疫荧光检测探究AM对疾病状态小胶质细胞自噬的作用及自噬在AM调节小胶质细胞降解SOD1中的作用.通过制备纳米颗粒包载的AM(NPAM)实现AM的体内给药.通过尾静脉注射的方式对SOD1*G93A ALS模型小鼠连续给予NPAM 30 d,1次/d.通过免疫组织化学染色检测NPAM给药后ALS小鼠腰段脊髓SOD1蛋白的聚集情况,通过尼氏染色和NeuN免疫组织化学染色检测神经元的损伤和丢失程度,通过转棒实验和后肢握紧实验评价ALS小鼠的运动能力,通过记录体质量和生存期评价ALS小鼠的疾病进程.结果·AM恢复了疾病状态小胶质细胞的ATP水平,增强了其对SOD1聚集体的摄取和通过自噬的降解;抑制AMPK通路后,AM的这些作用消失.NPAM减少了SOD1*G93A ALS模型小鼠腰段脊髓SOD1聚集体,减少了腰段脊髓神经元的损伤和丢失,还缓解了ALS小鼠的运动损伤和体质量丢失.结论·AM通过AMPK介导的能量平衡恢复作用增强了SOD1-ALS小胶质细胞模型对SOD1聚集体的清除,并显著改善了ALS模型小鼠的神经病理变化及疾病症状.