鹿茸多肽预处理通过miR-133a调控TGF-β/Smad信号通路对TBHP诱导心肌H9c2细胞损伤的保护作用

• Published in: 吉林大学学报（医学版） Vol. 49; no. 2; pp. 369 - 376
• Main Authors: 周高峰, 肖静, 周佳, 刘俊秀, 律广富, 王雨辰, 林贺, 黄晓巍
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 中国医学科学院药用植物研究所,北京100094%长春中医药大学 吉林省人参研究科学院中药药理组,吉林 长春 130117 28.03.2023; 长春中医药大学药学院临床药学与中药药理教研室,吉林 长春 130117%长春中医药大学药学院临床药学与中药药理教研室,吉林 长春 130117
• Subjects: 鹿茸多肽; 心肌损伤; 转化生长因子β; 血清药理学; 微小RNA-133a
• ISSN: 1671-587X
• DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230213

R285.5; 目的:探讨鹿茸多肽(VAP)预处理对叔丁基过氧化氢(TBHP)诱导大鼠心肌H9c2细胞损伤的保护作用,阐明VAP对miR-133a/转化生长因子β(TGF-β)/Smad轴的作用及其机制.方法:将H9c2心肌细胞分为空白对照组、空白血清组、TBHP组、TBHP+低剂量(100 mg·kg-1)VAP组、TBHP+高剂量(400 mg·kg-1)VAP组和miR-133抑制剂(miR-133 inhibitor)组.空白对照组不做任何处理,其余各组细胞经VAP处理24 h后,给予200μmol·L-1 TBHP处理;miR-133 inhibitor组细胞转染miR-133 inhibitor 24 h,给予400 mg·kg-1 VAP处理24 h,并给予200μmol·L-1 TBHP处理.MTT法检测各组H9c2细胞存活率,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组细胞培养上清液中肌钙蛋白T(cTnT)、肌钙蛋白I(cTnI)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组H9c2细胞中miR-133表达水平,Western blotting法检测各组H9c2细胞中转化生长因子β1(TGF-β1)、磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)和Smad4蛋白表达水平.结果:MTT法检测,与TBHP组比较,TBHP+低剂量VAP组和TBHP+高剂量VAP组H9c2细胞存活率升高(P<0.05),miR-133 inhibitor组H9c2细胞存活率差异无统计学意义(P>0.05).ELISA法检测,与空白对照组比较,TBHP组H9c2细胞中cTnT、cTnI和CK-MB水平升高(P<0.05);与TBHP组比较,TBHP+低剂量VAP组和TBHP+高剂量VAP组H9c2细胞中cTnT、cTnI和CK-MB水平降低(P<0.05).RT-qPCR法检测,与空白对照组比较,TBHP组H9c2细胞中miR-133a表达水平降低(P<0.05);与TBHP组比较,TBHP+低剂量VAP组和TBHP+高剂量VAP组H9c2细胞中miR-133a表达水平升高(P<0.05或P<0.01),miR-133 inhibitor组H9c2细胞中miR-133a表达水平明显降低(P<0.01).Western blotting法检测,与空白对照组比较,TBHP组H9c2细胞中TGF-β