茵陈蒿汤治疗肝纤维化的核心功能成分群以及潜在通路

• Published in: 南方医科大学学报 Vol. 44; no. 8; pp. 1508 - 1517
• Main Authors: 陈星梅, 刘琴文, 李镱, 钟晓宇, 樊奇灵, 马柯, 罗柳婷, 官道刚, 朱志博
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 南方医科大学广东省单细胞技术与应用重点实验室,广东 广州 510410 01.08.2024; 南方医科大学中西医结合医院,广东 广州 510220%南方医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系,广东 广州 510410
• Subjects: 网络药理学; CDR; 茵陈蒿汤; Yinchenhao Decoction; LX-2细胞; network pharmacology; 肝纤维化; core functional component groups; hepatic fibrosis; 核心功能成分群; 成分贡献率; LX-2 cells
• ISSN: 1673-4254
• DOI: 10.12122/j.issn.1673-4254.2024.08.09

目的 基于网络药理学和体外实验分析验证茵陈蒿汤(YCHD)治疗肝纤维化(HF)的核心功能成分群(CFCG)以及潜在通路.方法 在DisGeNET、Genecards、CMGRN和PTHGRN提取了HF的PPI数据,使用Cytoscape 3.9.1构建权重网络.从TCMSP中收集茵陈蒿汤所有化学成分,用PreADMET Web服务器和SwissTargetPrediction选择茵陈蒿汤潜在活性成分和靶点.构建融合模型获取功能效应空间并评估有效蛋白,得到CFCG,再进一步对所有目标进行GO和KEGG通路富集分析.细胞实验:体外培养人肝星状细胞(LX-2),分别设置空白组(不加TGF-β1刺激)、对照组NC(20 ng/mL TGF-β1刺激)和化合物组(0、50、100、200 μmol/L),CCK-8实验检测药物敏感性,qPCR实验检测化合物对LX-2中Ⅰ型胶原Α1(COL1A1)的影响,Western blotting实验分析评估化合物在TGF-β1刺激下对LX-2中潜在通路的影响,验证潜在治疗机制.结果 分析得到1005个致病基因,茵陈蒿汤潜在活性成分和靶点分别有226个和1529个,核心功能成分群有52个.根据模型计算结果,选取得分最高的乙酸苄酯、香草酸、苯甲酸甲酯、虎杖苷、月桂酸、阿魏酸进行CCK-8验证发现在200 μmol/L内无细胞毒性;在qPCR实验中,与TGF-β1组相比苯甲酸甲酯、虎杖苷、月桂酸和阿魏酸能够抑制TGF-β1诱导的LX-2活化.GO和KEGG分析及Western blotting验证发现,这4种成分在200 μmol/L浓度时对PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、ERK、p-ERK、P38 MAPK、p-P38 MAPK有不同程度的抑制.结论 茵陈蒿汤抗肝纤维化可能是其中的乙酸苄酯、香草酸、苯甲酸甲酯、虎杖苷、月桂酸、阿魏酸等成分通过抑制PI3K-AKT和MAPK通路实现的.