原代大鼠主动脉血管干细胞的体外培养扩增及鉴定

• Published in: 南方医科大学学报 Vol. 44; no. 10; pp. 1881 - 1886
• Main Authors: 马华根, 黄燕, 杨盈欣, 刘海琴, 唐元瑜, 丛伟红
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 中国中医科学院西苑医院,北京 100091 01.10.2024; 北京中医药大学中医学院,北京 100029%北京中医药大学中医学院,北京 100029%海军军医大学上海长征医院,上海 200003%福建中医药大学中医学院,福建 福州 350122%中国中医科学院西苑医院,北京 100091
• Subjects: vascular stem cells; primary culture; 血管重构; differentiation potential; 主动脉; vascular remodeling; 血管干细胞; 切段外膜贴壁培养法; 原代培养; adherent culture of the segmented outer membrane; immunophenotype; aorta; 免疫表型; 分化潜能
• ISSN: 1673-4254
• DOI: 10.12122/j.issn.1673-4254.2024.10.06

目的 采用"切段外膜贴壁培养法"体外培养扩增出原代大鼠主动脉血管干细胞,为开展血管重构及相关疾病研究提供实用的工具细胞.方法 无菌分离2～3周龄Sprague-Dawley大鼠胸腹主动脉,切成长约2.0 mm的血管节段,均匀种瓶,经外膜贴壁固化后进行原代培养,待细胞生长融合度达80%～90%时传代.镜下观察细胞形态及其生长特性,采用流式细胞仪分析目的细胞表面标志物CD分子表达情况,成脂、成骨诱导分化实验检测其多向分化潜能.结果 接种3 d后,少量梭形、星形或多角形的细胞从血管节段周围爬出;5～6 d后形成岛屿状细胞集落,细胞增殖迅速,呈放射状向外扩大,并出现细胞克隆现象;7～8 d后细胞融合成片,呈涡旋状分布;传至第3代后,细胞匀质性较高,表现为典型的"成纤维样"排列生长.流式细胞仪分析细胞主要表达CD44、CD73、CD90,阳性率分别为80.3%、62.2%、46.8%;低表达CD34、CD45、CD11b/c,阳性率分别为1.1%、0.2%、0.2%.体外诱导分化实验表明目的细胞具有成脂、成骨分化潜能.结论 "切段外膜贴壁培养法"可成功分离培养出具有间充质干细胞特性的大鼠主动脉血管干细胞.