博来霉素多次给药诱导小鼠肺纤维化模型的建立及评价

• Published in: 中国病理生理杂志 Vol. 40; no. 12; pp. 2393 - 2400
• Main Authors: 桑星洁, 张琴, 关庆洲, 赵鹏, 邢小香, 白云苹
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 河南中医药大学呼吸疾病中医药防治省部共建协同创新中心,河南省中医药防治呼吸病重点实验室,河南 郑州 450046 01.12.2024; 河南中医药大学第一附属医院,河南 郑州 450046%河南中医药大学呼吸疾病中医药防治省部共建协同创新中心,河南省中医药防治呼吸病重点实验室,河南 郑州 450046
• Subjects: bleomycin; 肺纤维化; model evaluation; 模型评价; 动物模型; pulmonary fibrosis; 博来霉素; animal model
• ISSN: 1000-4718
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2024.12.026

R563%R965%R363; 目的:建立多次气管滴注博来霉素(bleomycin,BLM)诱导的肺纤维化小鼠模型.方法:随机将C57BL/6J小鼠分为空白(control)组(5只)、BLM多次高剂量(BLM-MH)组(10只)、BLM多次中剂量(BLM-MM)组(8只)、BLM多次低剂量(BLM-ML)组(7只)、BLM单次中剂量(BLM-SM)组(6只);采用单次和多次气管滴注BLM的方法制备肺纤维化小鼠模型,并在第56天绘制生存曲线,收集肺组织,计算肺系数,观察苏木素-伊红(hematoxylin-eo-sin,H&E)和Masson染色的肺组织病理变化,检测羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)含量.利用GEO数据库筛选特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)患者的差异表达基因,并对差异基因进行KEGG通路富集分析,以确定与IPF发生相关的通路.通过Western blot检测各组小鼠肺组织中与IPF相关通路的变化.结果:BLM-MH组与BLM-MM组小鼠在第56天的生存率分别为50%和87.5%,其他组无死亡.与control组相比,模型组的肺系数显著升高(P＜0.05或P＜0.01),肺组织损伤、炎症水平和肺纤维化程度显著增加(P＜0.05或P＜0.01),HYP含量呈升高趋势.与BLM-SM组相比,BLM-MH组和BLM-MM组的肺泡炎、纤维化程度和HYP含量均显著升高(P＜0.05或P＜0.01).GEO数据库及京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析结果显示,细胞外基质-受体相互作用通路(extracellular matrix-receptor interaction pathway,ECM-RIP)可能参与IPF的发生.Western blot结果显示,与空白组相比,模型组肺组织中ECM-RIP通路相关蛋白,如磷酸化聚焦粘附激酶(phosphorylated focal adhesion kinase,p-FAK)和磷酸化Src蛋白(phosphorylated Src,p-Src)的表达水平均升高.与BLM-SM组相比,BLM-MH组小鼠肺组织中p-FAK和p-Src蛋白水平均显著升高(P＜0.05).结论:多次气管滴注BLM建立的小鼠肺纤维化模型能够