KLF4转录水平负调控miR-106a表达对人胃癌细胞BGC-823侵袭能力的影响

• Published in: 西安交通大学学报（医学版） Vol. 40; no. 3; pp. 356 - 361
• Main Authors: 朱萌, 张宁, 和水祥, 张丹, 张志勇
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 宁夏医科大学总医院消化内科,宁夏银川 750004%宁夏医科大学总医院病理科,宁夏银川,750004%西安交通大学第一附属医院消化内科,陕西西安,710061 01.05.2019; 西安交通大学第一附属医院消化内科,陕西西安 710061
• Subjects: 启动子; 胃癌; 微小RNA-106a(miR-106a); 侵袭; 转录因子; Krüppel样因子4(KLF4)
• ISSN: 1671-8259
• DOI: 10.7652/jdyxb201903004

R735.2; 目的 探讨转录因子kruppel样因子4(Krüppel-like factor 4,KLF4)对微小RNA-106a(miR-106a)表达的调控及其相互作用对人胃癌细胞侵袭能力的影响.方法 通过转录因子结合位点数据库JASPAR检索与miR-106a启动子区结合的转录因子KLF4.构建KLF4过表达载体(KLF4-pcDNA)和miR-106a报告基因(pmiR-106a-WT/MUT-luc),双荧光素酶报告基因检测KLF4对miR-106a启动子活性的影响.收集人胃癌和癌旁石蜡包埋-甲醛固定(for-malin-fixed paraffin-embedded,FFPE)标本各40例,实时定量PCR和免疫组织化学法检测KLF4表达.人胃癌细胞株BGC-823培养并按miR-106a mimic组、mimic NC组、KLF4+pcDNA组、pcDNA basic组分别进行处理,Transwell法检测各组胃癌细胞侵袭能力变化.结果 双荧光素酶报告基因检测显示KLF4-pcDNA具有拮抗miR-106a启动子活性的作用,表现为pmiR-106a-WT-luc荧光素酶活性被抑制(pmiR-106a-WT+pcDNA-basic与pmiR-106a-WT+pcDNA-KLF4比较,P<0.001),但对pmiR-106a-MUT-luc荧光素酶活性影响不明显(pmiR-106a-MUT+pcDNA-basic与pmiR-106a-MUT+pcDNA-KLF4比较,P>0.05).FFPE样本显示KLF4在胃癌组织中的相对表达量为0.69±0.59,与癌旁组织相比,差异有统计学意义(P<0.001),且与胃癌的细胞分化程度、淋巴转移和浸润深度相关(P<0.05);KLF4阳性表达主要位于胃黏膜上皮细胞核及胞质.Transwell实验表明各处理组胃癌细胞的穿膜数量不全相同(P<0.001),miR-106a mimic组为89.00±14.85,mimic NC组为50.90±17.94,KLF4+pcDNA组为37.70±12.60,pcDNA basic组为66.20±3.19.结论 转录因子KLF4与miR-106a启动子区至少存在体外的直接结合,可能通过在上游转录水平负调控miR-106a表达而参与影响胃癌细胞的侵袭转移进程.