过表达HDAC1通过诱导SP1去乙酰化改善类固醇诱导的小鼠骨细胞凋亡

目的 探究组蛋白脱乙酰基酶1(HDAC1)通过特异性蛋白1(SP1)调控激素性股骨头坏死(SONFH)的作用机制.方法 将小鼠骨样细胞MLY-O4分为对照组、曲古抑菌素(TSA)组、类固醇组、类固醇+oe-NC组、类固醇+oe-HD AC 1组、oe-NC组、oe-HDAC1组.对照组细胞正常培养,不接受试剂诱导及细胞转染;TSA组细胞接受400 nmol/LTSA处理24 h;类固醇组接受1 μmol/L地塞米松诱导24 h;类固醇+oe-NC组或类固醇+oe-HDAC1组接受oe-NC或oe-HDAC1转染,通过LipoHigh脂质体高效转染试剂行细胞转染,转染48 h后进行类固醇诱导.o...

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Published in南方医科大学学报 Vol. 45; no. 1; pp. 10 - 17
Main Authors 张申尧, 卢敏, 邝高艳, 许晓彤, 付俊, 曾楚然
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 湖南中医药大学,湖南长沙 410208 2025
湖南中医药大学第二附属医院骨伤科,湖南长沙 410005%湖南中医药大学,湖南长沙 410208
湖南中医药大学第一附属医院骨伤科,湖南长沙 410007%湖南中医药大学,湖南长沙 410208
Subjects
去乙酰化
steroid-induced osteonecrosis femoral head
激素性股骨头坏死
SP1
HDAC1
deacetylation
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ISSN1673-4254
DOI10.12122/j.issn.1673-4254.2025.01.02

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Summary:目的 探究组蛋白脱乙酰基酶1(HDAC1)通过特异性蛋白1(SP1)调控激素性股骨头坏死(SONFH)的作用机制.方法 将小鼠骨样细胞MLY-O4分为对照组、曲古抑菌素(TSA)组、类固醇组、类固醇+oe-NC组、类固醇+oe-HD AC 1组、oe-NC组、oe-HDAC1组.对照组细胞正常培养,不接受试剂诱导及细胞转染;TSA组细胞接受400 nmol/LTSA处理24 h;类固醇组接受1 μmol/L地塞米松诱导24 h;类固醇+oe-NC组或类固醇+oe-HDAC1组接受oe-NC或oe-HDAC1转染,通过LipoHigh脂质体高效转染试剂行细胞转染,转染48 h后进行类固醇诱导.oe-NC组或oe-HDAC1组接受oe-NC或oe-HDAC1转染.观察各组细胞在HDAC、HDAC1蛋白、SP1蛋白、凋亡相关蛋白(裂解capase-3及Bax)、乙酰化水平、细胞增殖、细胞凋亡方面的差异,采用通过免疫共沉淀验证HDAC1与SP1的相互作用.结果 类固醇组与对照组相比细胞凋亡率升高,HDAC1下调,裂解caspase-3及Bax上调,细胞增殖显著降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).TSA组、类固醇组与对照组相比,乙酰化水平显著升高,SP1蛋白显著上调,类固醇+oc-HDAC1组与类固醇+oe-NC组相比,乙酰化水平降低,HDAC1上调,SP1、裂解caspase-3、Bax下调,细胞增殖增强,细胞凋亡降低(P＜0.05).oe-NC组及oe-HDAC1组Input样本存在HDAC1蛋白条带,表明两组样本均可表达HDAC1,两组IgG抗体上并未检测出HDAC1蛋白,而两组SP1抗体上均存在HDAC1,表明HDAC1可与SP1相互作用.结论 HDAC1通过介导去乙酰化修饰抑制SP1表达,从而抑制类固醇诱导的骨细胞凋亡,并促进骨细胞增殖.
ISSN:1673-4254
DOI:10.12122/j.issn.1673-4254.2025.01.02