IRF8新发移码突变的基因功能分析

• Published in: 复旦学报（医学版） Vol. 51; no. 3; pp. 359 - 367
• Main Authors: 李乐盈, 陈尧, 周维涛, 何晨, 张端午, 钱莉玲
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 复旦大学生物医学研究院 上海 200032 30.05.2024; 国家儿童医学中心/复旦大学附属儿科医院呼吸科 上海 201102; 国家儿童医学中心/复旦大学附属儿科医院儿科研究所 上海 201102%国家儿童医学中心/复旦大学附属儿科医院儿科研究所 上海 201102
• Subjects: recurrent infection; transcription regulation; 转录调控; 反复感染; 移码突变; interferon regulatory factor 8(IRF8); frameshift mutation; 干扰素调节因子8(IRF8)
• ISSN: 1672-8467
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-8467.2024.03.010

R725; 目的 对反复肺炎患儿队列病因筛查中发现的干扰素调节因子8基因(interferon regulator factor 8,IRF8)新发突变(c.1266dupA)进行分子细胞水平的功能研究与验证.方法 针对IRF8突变序列构建野生与突变蛋白过表达载体,通过质粒转染或构建慢病毒感染不同工具细胞,通过qPCR、Western blot、免疫荧光等实验手段检测其表达差异及对下游炎症相关基因表达调控的改变.结果 IRF8野生及突变过表达载体构建成功,且转染效率可观,包装成的慢病毒感染效率亦较高.突变基因IRF8(c.1266dupA)相较于野生型IRF8转录水平降低,表达蛋白的相对分子质量略增大,表达量降低,突变蛋白IRF8mut相对野生型IRF8蛋白核质比增加,IRF8(c.1266dupA)对下游ISRE元件的抑制功能增强.结论 IRF8新发移码突变属于功能获得型(gain of function,GOF)突变.