circ_100284通过miR-217/MAPK1调控食管鳞状细胞癌侵袭及其对5-FU化疗敏感性的影响

• Published in: 解放军医学杂志 Vol. 49; no. 10; pp. 1184 - 1195
• Main Authors: 史艳伟, 米彩锋, 牛丽林, 杨洋
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 平顶山学院第一附属医院/平顶山市第一人民医院消化内科,河南 平顶山 467000%郑州大学第一附属医院胸外科,河南 郑州 450052 28.10.2024
• Subjects: circ_100284; esophageal cancer; 丝裂原活化蛋白激酶1; 食管癌; 化疗敏感性; mitogen-activated protein kinase 1; chemosensitivity; miR-217
• ISSN: 0577-7402
• DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.0787.2024.0201

R735.1; 目的 探究环状RNA(circ_100284)作为竞争性内源RNA(ceRNA)通过调控miR-217/丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)影响食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞侵袭及其对5-氟尿嘧啶(5-FU)化疗的敏感性.方法 生物信息学分析ESCC中差异表达的circRNAs.qRT-PCR检测ESCC组织和细胞中circ_100284的表达.使用浓度逐渐增加的5-FU处理ESCC细胞KYSE450以建立5-FU耐药KYSE450细胞系(KYSE450-R),MTT实验检测KYSE450和KYSE450-R细胞的IC50.qRT-PCR检测KYSE450和KYSE450-R细胞中circ_100284、miR-217和MAPK1 mRNA的表达,Western blotting检测MAPK1蛋白的表达.取KYSE450-R细胞,设置:(1)空白对照组(不做处理)、si-NC组(转染si-NC)、si-circ_100284组(转染si-circ_100284)、pc-Control组(转染pc-Control)、pc-circ_100284组(转染pc-circ_100284)、pc-circ_100284+mimic NC组(转染pc-circ_100284和mimic NC)与pc-circ_100284+miR-217 mimic组(转染pc-circ_100284 和miR-217 mimic),采用MTT实验检测细胞活力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况.(2)空白对照组(不做处理)、si-NC组(转染si-MAPK1的阴性对照)、si-MAPK1组(转染si-MAPK1)、si-MAPK1+inhibitor NC组(转染si-MAPK1和inhibitor NC)与si-MAPK1+miR-217 inhibitor组(转染si-MAPK1和miR-217 inhibitor),采用qRT-PCR和Western blotting检测MAPK1 mRNA和蛋白的表达,MTT实验检测细胞活力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况.将circ_100284-WT或circ_100284-MUT报告质粒、MAPK1-WT或MAPK1-MUT报告质粒分别与miR-NC或miR-217 mimic共转染KYSE450-R细胞48