早期香蕉枯萎病Foc4双探针核酸纸基检测传感器研制

S668.1%S24; 为实现对早期香蕉枯萎病4号生理小种(fusarium oxysporum f.sp.cubense 4,Foc4)的准确检测,该研究提出一种基于胶体金的双探针纸基传感器.该传感器将2种不同粒径的胶体金分别与检测探针和信号增强探针结合,利用DNA探针代替抗原和抗体,形成双探针体系,通过增加信号增强探针降低检测限.基于目标序列与双探针体系的碱基互补配对形成"金标探针-目标序列-T线探针"复合物并在传感器的测试区被捕获,10 min内形成肉眼可见的目标产物,通过分析测试条带得到光强度峰面积并代入标准曲线中,实现Foc4定量检测.试验结果表明,双探针纸基传感...

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Published in农业工程学报 Vol. 40; no. 5; pp. 38 - 46
Main Authors 杨洲, 区湘颖, 张志宏, 罗宇康, 何俊宇, 欧俊辰, 段洁利
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 华南农业大学工程学院,广州 510642 01.03.2024
岭南现代农业科学与技术广东省实验室,广州 510642
广东海洋大学机械工程学院,湛江,524088%华南农业大学工程学院,广州 510642%华南农业大学工程学院,广州 510642
Subjects
detection
sensors
nucleic acid lateral chromatography
双探针
检测
胶体金
Foc4
colloidal gold
传感器
dual-probe
核酸侧向层析
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ISSN1002-6819
DOI10.11975/j.issn.1002-6819.202312079

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Summary:S668.1%S24; 为实现对早期香蕉枯萎病4号生理小种(fusarium oxysporum f.sp.cubense 4,Foc4)的准确检测,该研究提出一种基于胶体金的双探针纸基传感器.该传感器将2种不同粒径的胶体金分别与检测探针和信号增强探针结合,利用DNA探针代替抗原和抗体,形成双探针体系,通过增加信号增强探针降低检测限.基于目标序列与双探针体系的碱基互补配对形成"金标探针-目标序列-T线探针"复合物并在传感器的测试区被捕获,10 min内形成肉眼可见的目标产物,通过分析测试条带得到光强度峰面积并代入标准曲线中,实现Foc4定量检测.试验结果表明,双探针纸基传感器的检测限达到0.001 nmol/L,是传统纸基传感器的100倍,提高了检测灵敏度;在0.001～1 000.000 nmol/L范围内,Foc4浓度与测试线光强度峰面积呈线性关系;使用高浓度非互补探针进行试验干扰,发现非互补序列对检测效果基本无影响,表明该传感器具有较好的特异性;香蕉叶片Foc4检测的平均回收率为77.6％～102.3％,相对标准偏差为7.4％～7.7％.与传统形态学观察等检测方法相比,该研究提出的双探针核酸纸基检测传感器可以及时、快速、准确地判断早期Foc4的存在,具有良好的推广性和实际应用价值.
ISSN:1002-6819
DOI:10.11975/j.issn.1002-6819.202312079