EuCAD基因小片段RNAi对烟草木质素合成的影响

S792.39%S572; [目的]深入研究尾叶桉(Eucalyptus urophylla)肉桂酰乙醇脱氢酶(CAD)基因序列中的关键片段并利用其进行木质素合成调控.[方法]采用生物信息学工具对EuCAD基因进行序列分析,根据编码蛋白保守结构域的分布情况进行筛选,获得一段44 bp关键序列用于构建RNA干扰载体并转化烟草,获得转基因植株并对基因表达水平、木质素含量等表型进行检测.[结果]获得28个转基因株系,转基因植株正常生长发育,与野生型无异,随机挑选3个株系进行检测,发现CAD基因表达水平均较野生型显著降低,以R1株系降幅最大,降至野生型的12.51％.对R1株系进一步检测发现,其茎部直...

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Published in广东农业科学 Vol. 47; no. 6; pp. 1 - 7
Main Authors 陈博雯, 肖玉菲, 李军集, 张烨, 覃子海, 张晓宁, 刘海龙
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 广西壮族自治区林业科学研究院 / 国家林业和草原局中南速生材繁育实验室 /广西优良用材林资源培育重点实验室,广西 南宁 530002 01.06.2020
Subjects
肉桂酰乙醇脱氢酶
烟草转化
RNA干扰片段
木质素合成
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ISSN1004-874X
DOI10.16768/j.issn.1004-874X.2020.06.001

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Summary:S792.39%S572; [目的]深入研究尾叶桉(Eucalyptus urophylla)肉桂酰乙醇脱氢酶(CAD)基因序列中的关键片段并利用其进行木质素合成调控.[方法]采用生物信息学工具对EuCAD基因进行序列分析,根据编码蛋白保守结构域的分布情况进行筛选,获得一段44 bp关键序列用于构建RNA干扰载体并转化烟草,获得转基因植株并对基因表达水平、木质素含量等表型进行检测.[结果]获得28个转基因株系,转基因植株正常生长发育,与野生型无异,随机挑选3个株系进行检测,发现CAD基因表达水平均较野生型显著降低,以R1株系降幅最大,降至野生型的12.51％.对R1株系进一步检测发现,其茎部直径与野生型无异,但木质部厚度较野生型显著降低,其中第4节处降低11.75％,第6节处降低10.06％,茎部整体木质素含量较野生型降低15.26％.表明该RNAi片段显著抑制烟草中CAD基因表达并影响烟草木质素合成.[结论]通过序列分析筛选出的EuCAD基因小片段,可通过RNA干扰显著影响烟草木质素合成,为尾叶桉木质素合成调控研究提供了技术参考.
ISSN:1004-874X
DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2020.06.001