棕色脂肪源性神经调节蛋白4对糖尿病肾病小鼠炎症保护作用的研究

• Published in: 中华糖尿病杂志 Vol. 15; no. 2; pp. 152 - 159
• Main Authors: 童佳悦, 徐金玲, 丁胜, 徐晓丽, 何凯悦, 石凌峰, 向光大
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 南方医科大学第一临床医学院，广州 510515%解放军中部战区总医院内分泌科，武汉 430070 01.02.2023
• Subjects: 糖尿病肾病; Neuregulin 4; 棕色脂肪; 炎症; 神经调节蛋白4; Diabetic nephropathy; Brown adipose tissue; Inflammation
• ISSN: 1674-5809
• DOI: 10.3760/cma.j.cn115791-20220510-00208

目的:探讨棕色脂肪源性神经调节蛋白4（NRG4）对糖尿病肾病（DN）小鼠炎症的保护作用。方法:采用高脂饲料喂养联合腹腔注射链脲佐菌素建立DN小鼠模型，造模成功后将野生型（WT）和NRG4基因敲除（KO）小鼠分为WT-DN+绿色荧光蛋白（D-WT-GFP）组、KO-DN+绿色荧光蛋白（D-KO-GFP）组、KO-DN+NRG4（D-KO-NRG4）组，D-WT-GFP组和D-KO-GFP组在小鼠肩胛间区棕色脂肪一次性注射腺相关病毒绿色荧光蛋白，D-KO-NRG4组注射腺相关病毒转录NRG4。另设普通饲料喂养WT小鼠作为对照组（WT-CON）。每组6只。8周实验结束后，检测各组小鼠糖化血红蛋白（HbA 1c）、血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、游离脂肪酸（FFA）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、尿白蛋白/肌酐比值（UACR）、血清白细胞介素（IL）-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等指标。采用过碘酸希夫染色和电镜观察足细胞损伤情况及肾组织病理改变。采用免疫组织化学法检测肾组织F4/80表达。采用实时荧光定量聚合酶链反应分析各组小鼠肾组织 IL-1β、 IL-6、 TNF-α mRNA表达量。采用Western blotting法检测D-KO-GFP组与D-KO-NRG4组小鼠各组织NRG4蛋白表达水平。采用单因素方差分析比较组间差异。采用Pearson相关分析法分析血清NRG4水平与血清炎症因子、UACR、肾组织F4/80表达的相关性。 结果:与D-WT-GFP组相比，D-KO-GFP组小鼠UACR明显升高（ P<0.01），肾小球面积增大，系膜基质增生和足细胞损伤，血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平显著升高且肾组织中 IL-1β、 IL-6、 TNF-α的mRNA表达也升高（ P<0.01），同时肾组织F4/80表达增加（ P<0.01）。此外，与D-WT-GFP组相比，D-KO-GFP组小鼠HbA 1c、TG、TC、FFA、LDL-C水平升高且体重增加（ P<0.01）。而与D-KO-GFP组相比，D-KO-NRG4组小鼠UACR水平降低（ P<0.01），肾脏炎症指标F4/80表达降低（ P<0.01），HbA 1c、TG、TC、FFA、LDL-C水平下降且体重降低（ P<0.01）。Pearson相关分析结果显示，血清NRG4与IL-1β、IL-