烟草靶斑病菌LFD-RAA快速检测方法的建立

S43; 为快速有效检测烟草靶斑病菌,以烟草靶斑病菌beta-tubulin基因序列保守区域为靶标位点,设计重组酶介导扩增技术(Recombinase aided amplification,RAA)引物,结合侧流层析试纸条(Lateral flow dipstick,LFD),建立烟草靶斑病菌快速检测体系并进行优化.结果表明,LFD-RAA检测体系在39 ℃恒温条件下反应30 min即可完成RAA扩增,并具有较高的特异性,其检测极限值为100 fg/μL,与PCR检测灵敏度相当.对检测体系优化确定检测扩增的最优时间为20~35 min、扩增温度为31~39 ℃.LFD-RAA检测体系可应用于...

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Published in烟草科技 Vol. 57; no. 5; pp. 41 - 47
Main Authors 肖艳松, 李思军, 吴文信, 刘天波, 周向平, 周陆苏, 钟杰
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 湖南省烟草公司郴州市公司,湖南省郴州市北湖区燕泉街道燕泉北路61号 423000%湖南省烟草科学研究所,长沙市芙蓉南路368号 410004%湖南省烟草公司永州市公司,湖南省永州市冷水滩区珍珠北路69号 425000%湖南农业大学植物保护学院,长沙市芙蓉区农大路1号 410128 01.05.2024
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ISSN1002-0861
DOI10.16135/j.issn1002-0861.2023.0408

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Summary:S43; 为快速有效检测烟草靶斑病菌,以烟草靶斑病菌beta-tubulin基因序列保守区域为靶标位点,设计重组酶介导扩增技术(Recombinase aided amplification,RAA)引物,结合侧流层析试纸条(Lateral flow dipstick,LFD),建立烟草靶斑病菌快速检测体系并进行优化.结果表明,LFD-RAA检测体系在39 ℃恒温条件下反应30 min即可完成RAA扩增,并具有较高的特异性,其检测极限值为100 fg/μL,与PCR检测灵敏度相当.对检测体系优化确定检测扩增的最优时间为20~35 min、扩增温度为31~39 ℃.LFD-RAA检测体系可应用于烟草上烟草靶斑病菌的快速检测.
ISSN:1002-0861
DOI:10.16135/j.issn1002-0861.2023.0408