ARTN通过PI3K/Akt通路促进恶性外周神经鞘瘤细胞的增殖和侵袭

• Published in: 中华肿瘤杂志 Vol. 47; no. 2; pp. 149 - 159
• Main Authors: 张洪亮, 刘昊天, 刘俊阳, 张超, 李婷, 廖智超, 刘艳成, 张净宇, 朱锴, 李爽, 刘金伟, 杨吉龙
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 天津市天津医院骨与软组织肿瘤科，天津300211%天津医科大学肿瘤医院骨与软组织肿瘤科，国家恶性肿瘤临床医学研究中心，天津市恶性肿瘤临床医学研究中心，天津市肿瘤分子流行病重点实验室，天津300202 23.02.2025
• Subjects: 侵袭; 磷脂酰肌醇3-激酶/Akt通路; 增殖; Phosphoinositide 3-kinase/Akt pathway; Malignant peripheral nerve sheath tumor; 神经鞘胚素; Proliferation; 恶性外周神经鞘瘤; Invasion; Artemin
• ISSN: 0253-3766
• DOI: 10.3760/cma.j.cn112152-20240531-00229

目的:探讨神经鞘胚素（ARTN）在恶性外周神经鞘瘤（MPNST）中的表达及其对MPNST细胞恶性行为的影响与作用通路。方法:收集1995年1月至2011年11月于天津医科大学肿瘤医院手术切除的51例MPNST石蜡包埋组织标本，采用免疫组织化学染色检测ARTN蛋白的表达，并分析ARTN蛋白表达与临床病理特征、预后的关系。利用人MPNST细胞系ST-8814（NF-1型）和STS26T（散发型），通过转染ARTN过表达质粒和ARTN小干扰RNA（siRNA）分别构建ARTN过表达和低表达细胞。采用实时定量聚合酶链反应检测ARTN mRNA的表达，Western bolt检测ARTN蛋白及磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/Akt信号通路相关蛋白的表达，细胞计数盒8（CCK-8）法检测细胞增殖能力，细胞侵袭实验检测细胞的侵袭能力。利用STRING数据库检索与ARTN相互作用的通路蛋白，通过京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析明确其作用通路。使用PI3K/Akt通路特异性抑制剂LY294002阻断ST-8814和STS26T细胞的PI3K/Akt通路，观察细胞增殖和侵袭能力的变化。结果:51例MPNST组织标本中，ARTN蛋白高表达22例，低表达29例。ARTN蛋白高表达与较大的肿瘤长径和疾病进展（复发或转移）有关（均 P＜0.05）。ARTN蛋白低表达组患者的中位无病生存时间（DFS）为26.2个月，中位总生存时间（OS）为66.9个月。ARTN蛋白高表达组患者的中位DFS为10.7个月，中位OS为53.8个月。Log rank检验结果显示，ARTN蛋白高表达组患者的无进展生存率比低表达组患者差（ P=0.027），但两组患者的总生存率差异无统计学意义（ P=0.790），Cox回归分析也证实了这一结果。CCK-8法检测结果显示，转染48 h，ARTN过表达组ST-8814和STS26T细胞的吸光度（ A）值分别为1.35±0.01和1.10±0.02，均高于空质粒对照组（1.05±0.01和0.78±0.01，均 P＜0.01），而ARTN siRNA组ST-8814和STS26T细胞的 A值分别为0.35±0.01和0.61±0.01，均低于对照siRNA组（0.74±0.01和1.10±0.04，均 P＜0.01）。转染72和96 h亦如此。细胞侵袭实验结果显示，ARTN过表达组ST-8814和STS26T细