基于InDel标记的斑节对虾早期性别鉴定方法的建立

S917.4; 为分辨斑节对虾(Penaeus monodon)发育早期的性别,利用改良的插入/缺失(InDel)标记追踪了从受精卵、无节幼体、溞状幼体、糠虾幼体、仔虾后1 d(PL1)、仔虾后30 d(PL30)及亚成虾个体的性别,建立了测序和荧光定量PCR熔解曲线的检测方法.结果表明,InDel标记可扩增获得雌雄特异性序列,用测序法判定亚成虾性别的结果与外部观察结果一致,准确率达100％,对受精卵、无节幼体、溞状幼体及糠虾幼体均可得到雌雄特异性序列;进而建立了基于SYBR Green实时荧光定量PCR(Quantitative real-time polymerase chain reac...

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Published in南方水产科学 Vol. 16; no. 3; pp. 113 - 118
Main Authors 黄智康, 江世贵, 周发林, 黄建华, 杨其彬, 姜松, 李运东, 杨丽诗
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 中国水产科学研究院南海水产研究所深圳试验基地,广东深圳 518121%中国水产科学研究院南海水产研究所/农业农村部南海渔业资源开发利用重点实验室,广东广州,510300 01.06.2020
中国水产科学研究院南海水产研究所/农业农村部南海渔业资源开发利用重点实验室,广东广州 510300%中国水产科学研究院南海水产研究所/农业农村部南海渔业资源开发利用重点实验室,广东广州 510300
上海海洋大学水产与生命学院,上海 201306
Subjects
性别鉴定
InDel标记
实时荧光定量PCR
斑节对虾
发育早期
熔解曲线
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ISSN2095-0780
DOI10.12131/20190222

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Summary:S917.4; 为分辨斑节对虾(Penaeus monodon)发育早期的性别,利用改良的插入/缺失(InDel)标记追踪了从受精卵、无节幼体、溞状幼体、糠虾幼体、仔虾后1 d(PL1)、仔虾后30 d(PL30)及亚成虾个体的性别,建立了测序和荧光定量PCR熔解曲线的检测方法.结果表明,InDel标记可扩增获得雌雄特异性序列,用测序法判定亚成虾性别的结果与外部观察结果一致,准确率达100％,对受精卵、无节幼体、溞状幼体及糠虾幼体均可得到雌雄特异性序列;进而建立了基于SYBR Green实时荧光定量PCR(Quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)熔解曲线的快速鉴定斑节对虾性别的方法,其中雄性特异序列的熔解温度(Melting temperature,Tm)为(79.10±0.10)℃,雌性为(78.45±0.20)℃,通过特异的熔解曲线可准确区分PL30、亚成虾和无节幼体Ⅵ期个体,准确率可达96.3％以上.
ISSN:2095-0780
DOI:10.12131/20190222