ATP含量与外源酶添加对罗非鱼肌原纤维蛋白磷酸化水平的影响

• Published in: 水产学报 Vol. 48; no. 7; pp. 35 - 45
• Main Authors: 喻叶, 魏涯, 陈胜军, 黄卉, 岑剑伟, 潘创, 李春生, 王迪, 王悦齐, 冯阳, 赵永强
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 中国水产科学研究院南海水产研究所,农业农村部水产品加工重点实验室,广东广州 510300 2024; 上海海洋大学食品学院,上海 201306%中国水产科学研究院南海水产研究所,农业农村部水产品加工重点实验室,广东广州 510300; 三亚热带水产研究院,海南省深远海渔业资源高效利用与加工重点实验室,海南三亚 572000
• Subjects: 肌原纤维蛋白; tilapia; 蛋白激酶A; 罗非鱼; alkaline phosphatase; 蛋白质磷酸化; protein phosphorylation; protein kinase A; ATP; myofibrillar protein; 碱性磷酸酶
• ISSN: 1000-0615
• DOI: 10.11964/jfc.20240514515

S983%TS254.4; 蛋白质磷酸化修饰可影响肌肉品质,为探究外源酶添加对罗非鱼肌原纤维蛋白蛋白质磷酸化水平的影响,在向罗非鱼肌原纤维蛋白溶液中分别加入蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)后进行体外孵育,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和荧光染色测定不同时间段内的磷酸化水平变化.并通过将罗非鱼肌肉浸泡在不同浓度ATP溶液中测定肌原纤维蛋白的蛋白磷酸化水平以探究ATP对其的影响.结果显示,在0～72h,PKA组磷酸化水平均显著高于对照组和AP组,PKA组整体磷酸化水平从0h的0.35±0.01上升至12 h的0.37±0.01,而后下降至72 h的0.29±0.01,呈先上升后下降的趋势,其中,肌球蛋白重链磷酸化水平和肌动蛋白磷酸化水平分别从0h的0.73±0.01、0.86±0.01 下降至 72 h 的 0.58±0.02 和 0.68±0.01.当孵育时间为 0、4、24 和48h时,3组磷酸化水平均具有显著差异.在外源添加0.3 mol/L ATP后,结果显示肌原纤维蛋白整体磷酸化水平(0.46±0.00)显著高于对照组(0.42±0.01).PKA可促进罗非鱼肌原纤维蛋白磷酸化修饰,AP则使其去磷酸化.研究表明,宰杀后罗非鱼肌肉中的ATP含量、PKA及AP活性水平是影响蛋白质磷酸化水平的关键因素.本研究可为探明罗非鱼品质变化机制与调控策略提供理论依据.