小檗碱通过下调METTL3表达抑制肾癌细胞侵袭和迁移的机制

R965; 目的 探讨小檗碱(BER)对人肾癌细胞侵袭、迁移的抑制作用及可能机制.方法 以人肾癌OSRC-2细胞为对象进行实验.采用alamarBlue法测定0(对照组)、25、50、75、100、125、150、175、200 μmol/L BER作用24、48 h后对OSRC-2细胞增殖的抑制作用.用0(对照组)、50、100 μmol/L BER作用于细胞48 h后,通过流式细胞术分析BER对细胞周期的影响;通过细胞划痕实验观察24、36 h时各组细胞的迁移能力;通过Transwell实验观察作用24 h时各组细胞的侵袭能力;并通过Western blot法检测上述药物作用48 h后细胞...

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Published in中国药房 Vol. 34; no. 15; pp. 1863 - 1868
Main Authors 杨天宇, 帅立雄, 许竞泽, 程馨阳, 许志明, 张永胜
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 苏州大学附属第二医院病理科,江苏 苏州 215004 01.08.2023
Subjects
侵袭
methyltransferase-like 3
invasion
N6-甲基腺嘌呤
人肾癌OSRC-2细胞
migration
甲基转移酶样蛋白3
N6-methyladenosine
迁移
human renal carcinoma OSRC-2 cell
小檗碱
berberine
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ISSN1001-0408
DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2023.15.14

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Summary:R965; 目的 探讨小檗碱(BER)对人肾癌细胞侵袭、迁移的抑制作用及可能机制.方法 以人肾癌OSRC-2细胞为对象进行实验.采用alamarBlue法测定0(对照组)、25、50、75、100、125、150、175、200 μmol/L BER作用24、48 h后对OSRC-2细胞增殖的抑制作用.用0(对照组)、50、100 μmol/L BER作用于细胞48 h后,通过流式细胞术分析BER对细胞周期的影响;通过细胞划痕实验观察24、36 h时各组细胞的迁移能力;通过Transwell实验观察作用24 h时各组细胞的侵袭能力;并通过Western blot法检测上述药物作用48 h后细胞中甲基转移酶样蛋白3(METTL3)的蛋白表达,通过RNA甲基化定量试剂盒检测各组细胞内RNA的N6-甲基腺嘌呤(m6A)水平.结果 与对照组比较,不同浓度BER均可显著升高OSRC-2细胞的增殖抑制率(P＜0.01),并呈时间和浓度依赖性趋势;50、100 μmol/L BER作用48 h后可将细胞周期阻滞在G0/G1期(P＜0.01);50、100 μmol/L BER组细胞的迁移、侵袭能力均显著降低(P＜0.05或P＜0.01),细胞中METTL3蛋白的表达水平和RNA的m6A水平均显著降低(P＜0.01).结论 BER可通过下调METTL3的表达,进而抑制m6A水平,从而抑制人肾癌细胞的侵袭、迁移.
ISSN:1001-0408
DOI:10.6039/j.issn.1001-0408.2023.15.14