下调视黄醇结合蛋白2基因表达对顺铂耐药卵巢癌细胞生物学特性的影响及其机制

• Published in: 中华肿瘤杂志 Vol. 44; no. 2; pp. 139 - 146
• Main Authors: 冯同富, 姚冬梅, 郑嵘, 姜朵生, 张伶俐, 邢琦, 李力
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 湖北省妇幼保健院妇科，武汉 430070%湖北省妇幼保健院中医科，武汉 430070%广西医科大学区域性高发肿瘤早期防治研究教育部重点实验室，南宁 530021 23.02.2022
• Subjects: 卵巢肿瘤; 侵袭; 沉默视黄醇结合蛋白2; Ovarian neoplasms; Migration; 迁移; Retinol-binding protein 2; Epithelial-mesenchymal transformation; Invasion; 上皮-间质转化
• ISSN: 0253-3766
• DOI: 10.3760/cma.j.cn112152-20200612-00555

目的:探讨下调视黄醇结合蛋白2(RBP2)基因表达对卵巢癌细胞生物学特性的影响及其机制。方法:建立稳定下调RBP2表达的顺铂(DDP)耐药卵巢癌细胞株SKOV3/DDP-RBP2i，并设置阴性对照组和空白对照组。采用细胞计数盒8(CCK-8)法检测细胞增殖能力，流式细胞术检测细胞凋亡情况，划痕实验和Transwell侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力，实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot法检测上皮-间质转化(EMT)相关分子标志物的表达。通过裸鼠移植瘤实验验证RBP2对卵巢癌生长的影响，采用美国TCGA数据库中的卵巢癌临床数据分析RBP2表达与肿瘤转移和患者预后的关系。结果:下调RBP2的表达后，SKOV3/DDP细胞的增殖能力明显下降，第5天时，SKOV3/DDP-RBP2i组、阴性对照组和空白对照组的增殖活性分别为(56.67±4.16)%、(84.67±3.51)%和(87.00±4.00)%，差异开始有统计学意义( P<0.001)。SKOV3/DDP-RBP2i组的凋亡率为(14.19±1.50)%，高于阴性对照组[(8.77±0.75)%]和空白对照组[(7.48±0.52)%， P<0.001]；侵袭细胞数为(55.20±2.39)个，低于阴性对照组和空白对照组[分别为(82.60±5.18)个和(80.80±7.26)个， P<0.001)]；划痕愈合率为(28.47±2.72)%，低于阴性对照组和空白对照组[分别为(50.58±4.06)%和(48.92±4.63)%， P<0.001]。SKOV3/DDP-RBP2i组细胞中E-cadherin的mRNA和蛋白表达量高于阴性对照组( P＝0.015， P<0.001)和空白对照组( P＝0.006， P<0.001)，N-cadherin的mRNA和蛋白表达量低于阴性对照组( P＝0.012， P<0.001)和空白对照组( P＝0.005， P<0.001)，vimentin的mRNA和蛋白表达量也低于阴性对照组( P＝0.016， P＝0.001)和空白对照组( P＝0.011， P＝0.001)。裸鼠接种细胞后，自第5周开始，SKOV3/DDP-RBP2i组、阴性对照组和空白对照组的肿瘤体积差异有统计学意义，SKOV3/DDP-RBP2i组的肿瘤体积小于阴性对照组和空白对照组( P＝0.001)。生物信息学分析