马氏珠母贝Bcl-2-like基因克隆及其功能初探

Q785%S917.4; B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma,Bcl-2)基因作为一种重要的细胞凋亡调控基因,在内源性细胞凋亡通路中发挥着重要的调控作用.实验利用cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆获得PmBcl-2-like基因cDNA全长序列,并对其序列进行生物信息学分析;利用实时定量PCR(qPCR)技术分析了PmBcl-2-like在马氏珠母贝不同组织、不同发育时期以及不同免疫刺激后的表达水平.结果 显示,PmBcl-2-like cDNA全长为2180 bp,开放阅读框长度为l 650 bp,共编码549个氨基酸,分子量为21.62ku;结构域预测分析表明PmBcl...

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Published in水产学报 Vol. 45; no. 5; pp. 661 - 671
Main Authors 房晓宸, 卢金昭, 梁海鹰, 何军军, 申铖皓
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 广东海洋大学水产学院,广东湛江524088 01.05.2021
广东海洋大学深圳研究院,广东深圳 518108%广东海洋大学水产学院,广东湛江524088
广东省水生动物健康评估工程技术研究中心,广东深圳518108
广东海洋大学深圳研究院,广东深圳 518108
Subjects
马氏珠母贝
基因表达
B淋巴细胞瘤-2
基因克隆
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ISSN1000-0615
DOI10.11964/jfc.20201012445

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Summary:Q785%S917.4; B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma,Bcl-2)基因作为一种重要的细胞凋亡调控基因,在内源性细胞凋亡通路中发挥着重要的调控作用.实验利用cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆获得PmBcl-2-like基因cDNA全长序列,并对其序列进行生物信息学分析;利用实时定量PCR(qPCR)技术分析了PmBcl-2-like在马氏珠母贝不同组织、不同发育时期以及不同免疫刺激后的表达水平.结果 显示,PmBcl-2-like cDNA全长为2180 bp,开放阅读框长度为l 650 bp,共编码549个氨基酸,分子量为21.62ku;结构域预测分析表明PmBcl-2-1ike含有Bcl-2家族典型的BHl-4结构域;多序列比对以及进化树构建结果表明,PmBcl-2-1ike与其他物种的相似度较高,保守性较强;荧光定量结果表明PmBcl-2-like在马氏珠母贝8个组织中均有表达,在鳃中表达量最高,其次为性腺,表达量最低为中央膜区;在胚胎期表达量较高,受精卯时期表达量最高.机体受到脂多糖(LPS)刺激后,相对表达量在24 h达到最高,72 h降到最低,最高约为最低的2.5倍;肽聚糖(PGN)刺激后,相对表达量在6h达到最高,48 h降到最低,最高约为最低的7.28倍;聚肌胞苷酸(Poly:IC)刺激后,相对表达量在3h达到最高,12h降到最低,最高约为最低的6.49倍.研究表明,PmBcl-2-like可能在马氏珠母贝发育和免疫防御反应中担任着重要的角色.
ISSN:1000-0615
DOI:10.11964/jfc.20201012445