长链非编码RNA H19促进血管钙化:基于抑制Bax抑制因子1/视神经萎缩蛋白1通路

• Published in: Nan fang yi ke da xue xue bao = Journal of Southern Medical University Vol. 43; no. 9; pp. 1469 - 1475
• Main Authors: 陈韦任, 杜辉, 沙媛, 周玉杰, 梁静, 陈韵岱, 马茜, 吴雪萍, 钱赓
• Format: Journal Article
• Language: Chinese; English
• Published: 中国广东 清华大学附属北京清华长庚医院心血管内科,北京 102218%中国人民解放军总医院第二医学中心心血管内科//国家老年疾病临床研究中心,北京 100853%首都医科大学附属北京安贞医院心内12病房//北京市心肺血管疾病研究所//冠心病精准治疗北京市重点实验室//首都医科大学冠心病临床诊疗与研究中心,北京 100029%中国人民解放军总医院第一医学中心心血管内科,北京 100853 20.09.2023; 首都医科大学附属北京安贞医院心内12病房//北京市心肺血管疾病研究所//冠心病精准治疗北京市重点实验室//首都医科大学冠心病临床诊疗与研究中心,北京 100029; 南方医科大学学报编辑部
• Subjects: Basic Research; 基础研究; Bax inhibitor 1; osteogenic differentiation; 长链非编码RNA H19; 视神经萎缩蛋白1; optic atrophy 1; vascular calcification; Bax抑制因子1; 细胞骨型分化; long noncoding RNA H19; 血管钙化
• ISSN: 1673-4254; 2663-0842
• DOI: 10.12122/j.issn.1673-4254.2023.09.03

目的 探讨长链非编码RNA H19(lncRNA H19)是否通过抑制Bax抑制因子1/视神经萎缩蛋白1(BI-1/OPA1)通路促进钙沉积、细胞骨型分化和细胞凋亡,进而诱导血管钙化.方法 β磷酸甘油和氯化钙药物诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)建立细胞钙化模型,将细胞分为5组:对照组(普通培养基培养14d)、钙化组(钙化培养基培养14d)、钙化+siH19组(敲低lncRNA H19表达后钙化培养基培养14d)、钙化+siH19+BI-1-/-组(敲低lncRNA H19和BI-1表达后钙化培养基培养14d)和钙化+siH19+ OPA1-/-组(敲低lncRNA H19和OPA1表达后钙化培养基培养14d).另ApoE-/-糖尿病小鼠使用高脂饲料喂养32周建立动物钙化模型.通过茜素红S染色和von Kossa染色检测钙沉积,通过Western blotting测定Runt相关转录因子2(Runx-2)、骨形态发生蛋白2(BMP-2)观察细胞骨型分化,通过TUNEL染色和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3检测观察细胞凋亡情况.结果 血管钙化后,lncRNA H19表达明显上升,BI-1和OPA1表达明显下降,而siRNA敲低lncRNA H19表达后,BI-1和OPA1蛋白表达明显上升;抑制BI-1后,OPA1再次下降(P<0.001).siRNA敲低lncRNA H19表达后,钙化结节消失,钙含量、Runx-2、BMP-2、活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达和细胞凋亡率均显著降低(P<0.001).siRNA敲低lncRNA H19基础上再抑制BI-1或OPA1蛋白,钙化结节出现,钙含量、Runx-2、BMP-2、活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达和细胞凋亡率均显著增加(P<0.001).结论 LncRNA H19通过抑制BI-1/OPA1蛋白通路诱导血管钙化,其可能机制和促进钙沉积、细胞骨型分化和细胞凋亡有关.