白细胞介素33在肝细胞癌患者中的表达及其对CD8+T淋巴细胞功能的调节作用

• Published in: Linchuang gandanbing zazhi Vol. 38; no. 1; pp. 117 - 123
• Main Authors: 王海鹏, 刘屹, 李东辉, 沈光辉
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: Changchun Journal of Clinical Hepatology 01.01.2022; 陕西省人民医院肿瘤内科,西安710068%陕西中医药大学附属医院肿瘤医院三病区,陕西咸阳712000
• Subjects: Cell growth; Cytokines; Liver cancer; Lymphocytes; Plasma; 癌,肝细胞;白细胞介素33;CD8阳性T淋巴细胞
• ISSN: 1001-5256; 2097-3497
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-5256.2022.01.018

目的 观察肝细胞癌(HCC)患者外周血白细胞介素33(IL-33)的变化，探讨IL-33对HCC患者CD8+T淋巴细胞的调节作用和可能机制。 方法 选择2019年4月—2020年1月陕西省人民医院收治的44例HCC患者和20例健康对照者为研究对象。采集外周血，分离血浆和外周血单个核细胞(PBMC)，酶联免疫吸附试验检测血浆IL-33及其受体肿瘤抑制素2(ST2)的水平，实时定量PCR法检测PBMC中IL-33和ST2 mRNA相对表达量。纯化CD8+T淋巴细胞，使用重组IL-33刺激培养，CCK-8法检测细胞增殖，酶联斑点吸附试验检测穿孔素和颗粒酶B分泌，流式细胞术检测程序性死亡受体-1(PD-1)、淋巴细胞活化基因-3(LAG-3)和细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA-4)表达，比较IL-33刺激前后细胞增殖、毒性分子分泌、免疫检查点分子的变化。CD8+T淋巴细胞与HepG2细胞共培养，通过检测乳酸脱氢酶表达计算CD8+T淋巴细胞诱导HepG2细胞死亡比例，比较IL-33刺激前后CD8+T淋巴细胞杀伤功能的变化。计量资料两组间比较采用t检验或配对t检验，相关性分析采用Pearson分析法。 结果 HCC组血浆IL-33水平低于对照组[(269.80±63.08) pg/mL vs (339.50±64.43) pg/mL，t=4.072，P＜0.001]，HCC组PBMC中IL-33 mRNA相对表达量低于对照组(1.07±0.14 vs 2.45±0.87，t=10.250，P＜0.001)。血浆ST2水平和PBMC中ST2 mRNA相对表达量在HCC组和对照组之间的差异均无统计学意义(P值均＞0.05)。CD8+T淋巴细胞比例与血浆IL-33、ST2水平均无明显相关性(P值均＞0.05)。HCC组CD8+T淋巴细胞分泌穿孔素、颗粒酶B的水平均低于对照组(P值均＜0.05)，而HCC组CD8+T淋巴细胞中PD-1、LAG-3、CTLA-4阳性细胞比例均高于对照组(P值均＜0.05)。重组IL-33刺激对两组CD8+T淋巴细胞增殖和免疫检查点分子表达均无显著影响(P值均＞0.05)，但可促进穿孔素、颗粒酶B的分泌(P值均＜0.05)。HCC组CD8+T淋巴细胞杀伤活性较对照组降低(P＜0.05)，重组IL-33刺激可提升CD8+T淋巴细胞杀伤功能，主要表现为诱导HepG2细胞死亡比例升高(P＜0.05)，I