扶正化瘀方通过改变急性肝损伤小鼠模型肝脏CD8+T淋巴细胞表型功能预防肝纤维化的价值分析

• Published in: Linchuang gandanbing zazhi Vol. 38; no. 2; pp. 342 - 346
• Main Authors: 黄辉, 徐列明, 平键, 周扬
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: Changchun Journal of Clinical Hepatology 01.01.2022; 上海中医药大学附属曙光医院,上海201203; 上海中医药大学肝病研究所,上海201203%上海中医药大学附属曙光医院,上海201203; 肝肾疾病病证教育部重点实验室,上海201203%上海中医药大学附属曙光医院,上海201203; 上海中医药大学肝病研究所,上海201203; 上海中医药大学附属曙光医院脑科学研究所,上海201203%上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院治未病中心,上海200437
• Subjects: Liver cirrhosis; Lymphocytes; 肝硬化;扶正化瘀方;肝星状细胞;CD8阳性T淋巴细胞
• ISSN: 1001-5256; 2097-3497
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-5256.2022.02.017

目的 观察应用扶正化瘀方后急性肝损伤小鼠模型肝脏CD8+ T淋巴细胞对共培养的肝星状细胞的影响，探讨扶正化瘀方预防肝纤维化的作用机制。 方法 18只SPF级雄性C57BL/6NCrl Vr小鼠随机分为正常组、模型组、扶正化瘀方组，每组6只。扶正化瘀方组提前给予扶正化瘀方灌胃5 d。实验前12 h以2 mL/kg体质量的剂量腹腔注射10%的CCl4，腹主静脉取血，留取血清并检测ALT、AST，留取部分肝脏做病理观察；应用流式细胞术分选小鼠肝脏CD8+ T淋巴细胞，预先小鼠体内用药，再与小鼠肝星状细胞株(JS 1)以2∶ 1比例共培养于96孔板中24 h、48 h，使用qPCR方法检测各组Col.Ⅰ mRNA和α-SMA mRNA表达变化。符合正态分布的计量资料多组间比较采用方差分析，进一步两两比较采用SNK-q或LSD-t检验。 结果 模型组的ALT和AST水平均显著高于正常组(P值均＜0.000 1)。扶正化瘀方组小鼠的ALT升高的幅度明显小于模型组(P＜0.001)。HE染色显示，扶正化瘀方组小鼠肝细胞变性、坏死程度较模型组有所减轻。与正常组比较, 模型组总淋巴细胞、CD45、CD4-CD8+T、CD8+CD28-T显著上升, 而扶正化瘀方组与模型组相比较, 上述淋巴细胞比例显著降低(P值均＜0.001)。自各组小鼠肝脏分离的CD8+ T淋巴细胞与JS 1共培养48 h，模型组与对照组(JS 1单培养)和正常组相比α-SMA mRNA的表达明显增加(P值均＜0.01)；Col.Ⅰ mRNA表达也明显高于对照组和正常组(正常小鼠肝脏CD8+ T淋巴细胞与JS 1共培养)(P值均＜0.001)。扶正化瘀方组α-SMA mRNA和Col.Ⅰ mRNA表达显著低于模型组(P值均＜0.01)。 结论 扶正化瘀方能通过改变小鼠肝脏CD8+ T淋巴细胞功能表型间接抑制活化的肝星状细胞。