不規則抗体スクリーニング赤血球試薬のDTT処理後の赤血球抗原保存性の検討
Daratumumab（DARA）は多発性骨髄腫の骨髄腫細胞に多く発現しているCD38に特異的に結合し治療効果を認める薬剤である．CD38はヒト赤血球表面上に発現しており，DARA投与後の血清を用いた不規則抗体スクリーニングや交差適合試験では汎凝集反応を呈することが判っている．今回の検討はDARAの非特異反応を回避し，かつジチオスレイトール（Dithiothreitol：DTT）により臨床的に問題となる抗原が変性しない至適濃度について検討した．次いで，DTT処理したスクリーニング赤血球試薬の保存について併せて検討を行った．方法：DTT濃度とDTTを溶解するリン酸緩衝生理食塩液（PBS）のpHを...
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| Published in | 日本輸血細胞治療学会誌 Vol. 65; no. 5; pp. 800 - 809 |
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| Main Authors | , , , , , , , , , , , , |
| Format | Journal Article |
| Language | Japanese |
| Published |
一般社団法人 日本輸血・細胞治療学会
25.10.2019
日本輸血・細胞治療学会 |
| Subjects | |
| Online Access | Get full text |
| ISSN | 1881-3011 1883-0625 |
| DOI | 10.3925/jjtc.65.800 |
Cover
| Abstract | Daratumumab（DARA）は多発性骨髄腫の骨髄腫細胞に多く発現しているCD38に特異的に結合し治療効果を認める薬剤である．CD38はヒト赤血球表面上に発現しており，DARA投与後の血清を用いた不規則抗体スクリーニングや交差適合試験では汎凝集反応を呈することが判っている．今回の検討はDARAの非特異反応を回避し，かつジチオスレイトール（Dithiothreitol：DTT）により臨床的に問題となる抗原が変性しない至適濃度について検討した．次いで，DTT処理したスクリーニング赤血球試薬の保存について併せて検討を行った．方法：DTT濃度とDTTを溶解するリン酸緩衝生理食塩液（PBS）のpHを調整し，至適な条件を設定した．また調製後のDTT処理赤血球の保存性について血清学的および光学的に抗原反応性を確認した．結果：DTT濃度の至適濃度は0.01mol/l，DTTを溶解するPBSはpH7.0以上であれば問題なくCD38の変性が確認できた．同時にKell血液型抗原についてはやや抗原性は低下するが検出は可能であった．DTT処理赤血球の保存性については，DTT処理後28日目であっても主要抗原の抗原性は確認できた．考察：DTT処理赤血球試薬の調製は都度実施するのが煩雑である．不規則抗体スクリーニング赤血球試薬をDTT処理後，保存が可能であれば，検査室で都度のDTT処理の作業が軽減でき，効率の良い検査が可能である． |
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| AbstractList | Daratumumab（DARA）は多発性骨髄腫の骨髄腫細胞に多く発現しているCD38に特異的に結合し治療効果を認める薬剤である．CD38はヒト赤血球表面上に発現しており，DARA投与後の血清を用いた不規則抗体スクリーニングや交差適合試験では汎凝集反応を呈することが判っている．今回の検討はDARAの非特異反応を回避し，かつジチオスレイトール（Dithiothreitol：DTT）により臨床的に問題となる抗原が変性しない至適濃度について検討した．次いで，DTT処理したスクリーニング赤血球試薬の保存について併せて検討を行った．方法：DTT濃度とDTTを溶解するリン酸緩衝生理食塩液（PBS）のpHを調整し，至適な条件を設定した．また調製後のDTT処理赤血球の保存性について血清学的および光学的に抗原反応性を確認した．結果：DTT濃度の至適濃度は0.01mol/l，DTTを溶解するPBSはpH7.0以上であれば問題なくCD38の変性が確認できた．同時にKell血液型抗原についてはやや抗原性は低下するが検出は可能であった．DTT処理赤血球の保存性については，DTT処理後28日目であっても主要抗原の抗原性は確認できた．考察：DTT処理赤血球試薬の調製は都度実施するのが煩雑である．不規則抗体スクリーニング赤血球試薬をDTT処理後，保存が可能であれば，検査室で都度のDTT処理の作業が軽減でき，効率の良い検査が可能である． Daratumumab(DARA)は多発性骨髄腫の骨髄腫細胞に多く発現しているCD38に特異的に結合し治療効果を認める薬剤である. CD38はヒト赤血球表面上に発現しており, DARA投与後の血清を用いた不規則抗体スクリーニングや交差適合試験では汎凝集反応を呈することが判っている. 今回の検討はDARAの非特異反応を回避し, かつジチオスレイトール(Dithiothreitol: DTT)により臨床的に問題となる抗原が変性しない至適濃度について検討した. 次いで, DTT処理したスクリーニング赤血球試薬の保存について併せて検討を行った. 方法: DTT濃度とDTTを溶解するリン酸緩衝生理食塩液(PBS)のpHを調整し, 至適な条件を設定した. また調製後のDTT処理赤血球の保存性について血清学的および光学的に抗原反応性を確認した. 結果: DTT濃度の至適濃度は0.01mol/l, DTTを溶解するPBSはpH7.0以上であれば問題なくCD38の変性が確認できた. 同時にKell血液型抗原についてはやや抗原性は低下するが検出は可能であった. DTT処理赤血球の保存性については, DTT処理後28日目であっても主要抗原の抗原性は確認できた. 考察: DTT処理赤血球試薬の調製は都度実施するのが煩雑である. 不規則抗体スクリーニング赤血球試薬をDTT処理後, 保存が可能であれば, 検査室で都度のDTT処理の作業が軽減でき, 効率の良い検査が可能である. |
| Author | 奥田, 誠 日髙, 陽子 舘野, 友紀 町田, 保 山田, 由香里 栗林, 智子 遊佐, 貴司 齋藤, 光平 祖父江, 晃基 塩野, 則次 瀬崎, 晴美 石橋, 瑞樹 田中, 美里 |
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| References | 5) Deaglio S, Canella D, Baj G, et al: Evidence of an immunologic mechanism behind the therapeutical effects of arsenic trioxide (As (2) O (3) ) on myeloma cells. Leuk Res, 25: 227-235, 2001. 19) Disbro WL: Stability guidelines for dithiothreitol-treated red blood cell reagents used for antibody detection methods in patients treated with daratumumab. Immunohematology, 33: 105-109, 2017. 17) Hosokawa M, Kashiwagi H, Nakayama K, et al: Distinct effects of daratumumab on indirect and direct antiglobulin tests: a new method employing 0.01 mol/L dithiothreitol for negating the daratumumab interference with preserving K antigenicity (Osaka method). Transfusion, 58: 3003-3013, 2018. 18) Cleland WW: Dithiothreitol, A New Protective Reagent for SH Groups. Biochemistry, 3: 480-482, 1964. 16) TECHNICAL MANUAL. AABB, 18th EDITION, 2014. 14) Sigle JP, Mihm B, Suna R, et al: Extending shelf life of dithiothreitol-treated panel RBCs to 28 days. Vox sang, 113: 397-399, 2018. 1) de Weers M, Tai YT, van der Veer MS, et al: Daratumumab, a novel therapeutic human CD38 monoclonal antibody, induces killing of multiple myeloma and other hematological tumors. J Immunol, 186: 1840-1848, 2011. 2) Plesner T, Lokhorst H M, Gimsing P, et al: Daratumumab, a CD38 monoclonal antibody in patients with multiple myeloma-data from a dose-escalation phase I/II study. ASH Annual Meeting Abstracts, 120: 73, 2012. 20) Hugan SL, Cooling L, Larsson VM: An evaluation of storage time for dithiothreitol-treated reagent cells. Transfusion, 57: 2545-2546, 2017. 7) Zocchi E, Franco L, Guida L, et al: A single protein immunologically identified as CD38 displays NAD1 glycohydrolase, ADP-ribosyl cyclase and cyclic ADP-ribose hydrolase activities at the outer surface of human erythrocytes. Biochem Biophys Res Commun, 196: 1459-1465, 1993. 6) Mehta K, Shahid U, Malavasi F: Human CD38, a cell surface protein with multiple functions. FASEB J, 10: 1408-1417, 1996. 8) Albeniz I, Demir O, Türker-Sener L, et al: Erythrocyte CD38 as a prognostic marker in cancer. Hematology, 12: 409-414, 2007. 9) Egea PF, Muller-Steffner H, Kuhn I, et al: Insights into the Mechanism of Bovine CD38/NAD+Glycohydrolase from the X-Ray Structures of Its Michaelis Complex and Covalently-Trapped Intermediates. PLoS ONE, 7 (4): e34918, 2012. 13) Chapuy CI, Aguad MD, Nicholson RT, et al: International validation of a dithiothreitol (DTT)-based method to resolve the daratumumab interference with blood compatibility testing. Transfusion, 56: 2964-2972, 2016. 15) Branch DR, Muensch HA, Sy Siok Hian AL, et al: Disulfide bonds are a requirement for Kell and Cartwright (Yta) blood group antigen integrity. Br J Heamatol, 54: 573-578, 1983. 12) Hamilton HB, Nakahara Y: The rare Kell blood group phenotype Ko in a Japanese family. Vox Sang, 20: 24-28, 1971. 3) Lokhorst HM, Plesner T, Laubach J P, et al: Targeting CD38 with daratumumab monotherapy in multiple myeloma. N Engl J Med, 373: 1207-1219, 2015. 11) 内川 誠: Kell (KEL) 血液型, Kx (XK) 血液型. 編者 前田平生, 大戸 斉, 岡崎 仁, 輸血学, 改訂第4版, 中外医学社, 東京, 2018, 328-346. 10) THE BLOODGROUP ANTIGEN FactsBook, Third Edition, 2012. 4) Chapuy CI, Nicholson R T, Aguad M D, et al: Resolving the daratumumab interference with blood compatibility testing. Transfusion, 55: 1545-1554, 2015. |
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| SourceID | medicalonline jstage |
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| SubjectTerms | CD38 Daratumumab DTT スクリーニング赤血球の保存 間接抗グロブリン試験 |
| Title | 不規則抗体スクリーニング赤血球試薬のDTT処理後の赤血球抗原保存性の検討 |
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| ispartofPNX | 日本輸血細胞治療学会誌, 2019/10/25, Vol.65(5), pp.800-809 |
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