兴奋性hiPSC源性类神经网络组织的构建

• Published in: Zhongshan da xue xue bao. Zhongshan daxue xuebao yixue kexue ban = Journal of Sun Yat-sen University. Yi xue ke xue ban Vol. 44; no. 4; pp. 625 - 633
• Main Authors: 苏琪淞, 李戈, 许金海, 蒋斌, 位庆帅, 曾湘, 曾园山, 朱平
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 广东省心脏病发病机制与精准防治重点实验室//广州市心脏病发病机制与防治重点实验室, 广东广州 510100%中山大学中山医学院组织学与胚胎学教研室, 广东 广州510080 01.07.2023; 华南理工大学生物科学与工程学院, 广东广州510006; 广东省心脏病发病机制与精准防治重点实验室//广州市心脏病发病机制与防治重点实验室, 广东广州 510100%广东省脑功能与脑疾病重点实验室, 广东广州 510080%中山大学中山医学院组织学与胚胎学教研室, 广东 广州510080%中山大学中山医学院组织学与胚胎学教研室, 广东 广州510080; 医学研究部, 南方医科大学附属广东省人民医院//广东省医学科学院, 广东广州 510100; 广东省脑功能与脑疾病重点实验室, 广东广州 510080%华南理工大学生物科学与工程学院, 广东广州510006; 广东省心脏病发病机制与精准防治重点实验室//广州市心脏病发病机制与防治重点实验室, 广东广州 510100; 广东省心血管病研究所, 南方医科大学附属广东省人民医院//广东省医学科学院, 广东广州510100; Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
• Subjects: 人诱导多能干细胞源性神经前体细胞; 兴奋性神经元; 去细胞视神经; 突触; 类神经网络组织; 去细胞视神经; 突触; 人诱导多能干细胞源性神经前体细胞; 类神经网络组织; 兴奋性神经元
• ISSN: 1672-3554
• DOI: 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).202305

R318; [目的]将人诱导多能干细胞源性神经前体细胞(hiPSC-NPCs)种植于去细胞视神经(DON)上,在体外构建一种具有突触传递功能的类神经网络组织,为神经组织损伤的修复提供一种有效途径.[方法]通过定向诱导和组织工程技术,联合应用hiPSCs和3D DON支架,构建一种新的类神经网络组织.定向诱导人诱导多能干细胞(hiPSCs)向人神经前体细胞(hNPCs)及神经元方向分化,使用免疫荧光染色鉴定细胞分化效率.制备3D DON支架,借助扫描电镜、Tunnel染色,鉴定支架形貌及细胞相容性.将诱导的hiPSC-NPCs种植于DON支架中,借助免疫荧光染色、扫描电镜、透射电镜和膜片钳对构建的类神经网络组织进行形态学观察和功能学鉴定.[结果]①免疫细胞化学染色结果提示,诱导的hiPSC-NPCs在体外大部分向神经元方向分化,成功构建了一种以神经元为主的神经网络.②扫描电镜和免疫组织化学结果提示,在体外成功构建了一种以兴奋性神经元为主的类神经网络组织.③免疫组织化学染色、透射电镜和膜片钳结果提示,构建的类神经网络组织能够传递兴奋性突触信息.[结论]利用天然来源的具有均匀孔道分布的DON生物支架材料和hiPSC-NPCs的有机结合,构建了一种以兴奋性神经元为主的具有突触传递功能的类神经网络组织,这种神经网络可作为脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)等神经组织损伤后组织替换疗法的有利工具,具有广阔的临床应用前景.