小RNA干扰对高表达RegIα基因胃癌细胞株增殖的影响

R78; 目的:探讨小RNA干扰(small interfering RNA,RNAi)对胃癌细胞株RegIα基因表达的抑制作用及对细胞增殖和凋亡的影响.方法:RT-PCR检测6株胃癌细胞的RegIα基因mRNA表达水平;体外构建RegIα基因小RNA干扰的重组质粒,分别稳定转染RegIα高表达细胞株MKN45和AGS,并设空载体作为对照组;应用RT-PCR和Western blot测定转染后细胞RegIα基因及其蛋白的表达水平;应用MTT法和流式细胞仪检测RegIα小RNA干扰对细胞增殖抑制率和凋亡的影响.结果:RT-PCR显示:与空载体组相比,转染RegIα小RNA干扰质粒后,MKN45和...

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Published in浙江大学学报（医学版） Vol. 40; no. 1; pp. 57 - 63
Main Authors 陆晓凤, 王良静, 周群燕, 姒健敏
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 浙江大学邵逸夫临床医学研究所胃肠病实验室、浙江省生物治疗重点实验室,浙江,杭州,310006%浙江大学医学院附属第二医院消化科,浙江,杭州,310009 2011
Subjects
细胞凋亡
RNA,小分子干扰
再生/遗传学
转染
遗传载体
基因表达
胃肿瘤
质粒
细胞增殖
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ISSN1008-9292
DOI10.3785/j.issn.1008-9292.2011.01.011

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Summary:R78; 目的:探讨小RNA干扰(small interfering RNA,RNAi)对胃癌细胞株RegIα基因表达的抑制作用及对细胞增殖和凋亡的影响.方法:RT-PCR检测6株胃癌细胞的RegIα基因mRNA表达水平;体外构建RegIα基因小RNA干扰的重组质粒,分别稳定转染RegIα高表达细胞株MKN45和AGS,并设空载体作为对照组;应用RT-PCR和Western blot测定转染后细胞RegIα基因及其蛋白的表达水平;应用MTT法和流式细胞仪检测RegIα小RNA干扰对细胞增殖抑制率和凋亡的影响.结果:RT-PCR显示:与空载体组相比,转染RegIα小RNA干扰质粒后,MKN45和AGS细胞的RegIαmRNA明显被抑制;Western blot结果显示:MKN45和AGS细胞的RegIα蛋白表达水平分别降低至空载体组的(44±4)%和(25±4)%;MTT结果显示:RegIα小RNA干扰后MKN45和AGS细胞增殖均受到抑制,凋亡率分别为(12.96±0.50)%和(11.59±1.10)%,与空载体组比差异有统计学意义(P＜0.05).结论:小RNA干扰可有效抑制胃癌细胞株中RegIα基因的表达,具有抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡的重要作用.
ISSN:1008-9292
DOI:10.3785/j.issn.1008-9292.2011.01.011