新型半胱氨酰白三烯受体GPR17的多克隆抗体制备及其鉴定

Q421; 目的:制备新型半胱氨酰白三烯受体GPR17的多克隆抗体(pAb),并鉴定其免疫学特性.方法:以KLH偶联的GPR17多肽免疫家兔制备其pAb,用间接ELISA法测定抗体效价,阻断ELISA测定抗体敏感性及特异性,同时以新制备的抗体做Western blot,检测GPR17的组织表达.结果:通过免疫家兔获得的抗GPR17 pAb,ELISA测定显示其抗体效价最高可达到1/16 364,并对CysLT1受体和CysLT2受体基本无交叉反应,具有较好的特异性.Western blot结果显示,GPR17在大鼠脑和心脏组织中有较高的表达,其分子量在43 kD左右.结论:制备的GPR17 p...

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Published in浙江大学学报（医学版） Vol. 38; no. 4; pp. 357 - 361
Main Authors 戚玲玲, 卢韵碧, 史文珍, 赵春贞, 张咏梅, 陈丽萍, 张丽慧, 方三华, 鲍建芳, 沈建根, 魏尔清
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 浙江大学医学院药理学系,浙江,杭州,310058%衢州学院医学院药理学教研室,浙江,衢州,324000%杭州师范大学基础医学院药理学教研室,浙江,杭州,310036%浙江大学医学院免疫研究所,浙江,杭州,310058 2009
Subjects
GPR17
Cysteine
Cysteinyl leukotriene receptor
Polyclonal antibody
受体,白三烯
半胱氨酸
Receptors,leukotriene
半胱氨酰白三烯受体
多克隆抗体
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ISSN1008-9292
DOI10.3785/j.issn.1008-9292.2009.04.006

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Summary:Q421; 目的:制备新型半胱氨酰白三烯受体GPR17的多克隆抗体(pAb),并鉴定其免疫学特性.方法:以KLH偶联的GPR17多肽免疫家兔制备其pAb,用间接ELISA法测定抗体效价,阻断ELISA测定抗体敏感性及特异性,同时以新制备的抗体做Western blot,检测GPR17的组织表达.结果:通过免疫家兔获得的抗GPR17 pAb,ELISA测定显示其抗体效价最高可达到1/16 364,并对CysLT1受体和CysLT2受体基本无交叉反应,具有较好的特异性.Western blot结果显示,GPR17在大鼠脑和心脏组织中有较高的表达,其分子量在43 kD左右.结论:制备的GPR17 pAb具有较高的效价和较好的特异性,能满足Western blot检测GPR17的要求.
ISSN:1008-9292
DOI:10.3785/j.issn.1008-9292.2009.04.006