多发性骨髓瘤MMSA-1抗原的二级结构预测及多克隆抗体的制备
目的 运用生物信息学技术研究人多发性骨髓瘤MMSA-1(GenBank:AY952881)基因表达蛋白的二级结构和B细胞抗原表位,并制备多克隆抗体。方法应用DNAStar Protean软件提供的模块分析和预测MMSA-1蛋白的二级结构和B细胞抗原表位。采用多通道同步固相全自动合成系统合成15肽,免疫健康新西兰成年家兔,制备相应的多克隆抗体。结果MMSA-1蛋白含有较多的8折叠和转角结构。综合柔韧性、亲水性、抗原性、表面可能性、二级结构、偶联难易及实验难度等因素,选取了MMSA-1蛋白序列318~333位作为抗原表位,即SSSLLPQSPAPTEHL,15肽合成产物经HPLC纯化和质谱检测,纯...
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Published in | Xi'an jiao tong da xue xue bao. Journal of Xi'an Jiaotong University (medical sciences). Yi xue ban Vol. 30; no. 4; pp. 449 - 452 |
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Main Author | |
Format | Journal Article |
Language | Chinese |
Published |
西安交通大学医学院第二附属医院血液内科,陕西西安,710004
2009
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Subjects | |
Online Access | Get full text |
ISSN | 1671-8259 |
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Summary: | 目的 运用生物信息学技术研究人多发性骨髓瘤MMSA-1(GenBank:AY952881)基因表达蛋白的二级结构和B细胞抗原表位,并制备多克隆抗体。方法应用DNAStar Protean软件提供的模块分析和预测MMSA-1蛋白的二级结构和B细胞抗原表位。采用多通道同步固相全自动合成系统合成15肽,免疫健康新西兰成年家兔,制备相应的多克隆抗体。结果MMSA-1蛋白含有较多的8折叠和转角结构。综合柔韧性、亲水性、抗原性、表面可能性、二级结构、偶联难易及实验难度等因素,选取了MMSA-1蛋白序列318~333位作为抗原表位,即SSSLLPQSPAPTEHL,15肽合成产物经HPLC纯化和质谱检测,纯度达到98.65%,序列正确。免疫兔子获得血清抗体采用层析柱纯化,ELISA检测效价:1:6000。结论本研究为基于人MMSA-1抗原表位手段的免疫治疗研究提供了理论依据。 |
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Bibliography: | multiple myeloma MMSA-1 secondary structure epitopepolyclonal antibody R730.2 61-1399/R |
ISSN: | 1671-8259 |