EMA结合PCR技术有效鉴别副溶血弧菌死活细胞

将EMA（Ethidium monoazide）选择渗透性和PCR技术相结合,建立检验副溶血弧菌Vibrio parahaemolyticus死活细胞的EMA-PCR新方法.研究表明,25μg/mL或更高质量浓度的EMA可以抑制2.0×107CFU/mL的副溶血弧菌死细胞DNA的扩增,未经EMA处理的对应样品PCR反应呈阳性;而用相同浓度EMA处理2.0×107CFU/mL的活细胞菌悬液能扩增出目的产物.同时,对EMA处理中卤素灯的曝光时间进行优化,确定EMA处理的最佳曝光时间为5~10 min.结果证明,该方法是一种快速有效的检测死活细胞的新方法,能有效避免PCR检测假阳性结果的出现....

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Published inHua nan nong ye da xue xue bao Vol. 32; no. 1; pp. 108 - 111
Main Author 李青 钟青萍 王丽
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 广东省高等学校食品质量安全重点开放实验室,华南农业大学食品学院,广东广州,510642 2011
Subjects
EMA
PCR
副溶血弧菌
死活细胞
EMA
副溶血弧菌
死活细胞
PCR
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ISSN1001-411X
DOI10.3969/j.issn.1001-411X.2011.01.023

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Summary:将EMA（Ethidium monoazide）选择渗透性和PCR技术相结合,建立检验副溶血弧菌Vibrio parahaemolyticus死活细胞的EMA-PCR新方法.研究表明,25μg/mL或更高质量浓度的EMA可以抑制2.0×107CFU/mL的副溶血弧菌死细胞DNA的扩增,未经EMA处理的对应样品PCR反应呈阳性;而用相同浓度EMA处理2.0×107CFU/mL的活细胞菌悬液能扩增出目的产物.同时,对EMA处理中卤素灯的曝光时间进行优化,确定EMA处理的最佳曝光时间为5~10 min.结果证明,该方法是一种快速有效的检测死活细胞的新方法,能有效避免PCR检测假阳性结果的出现.
Bibliography:44-1110/S
EMA; PCR; Vibrio parahaemolyticus; viable and dead bacteria
EMA
Vibrio parahaemolyticus
TS201.6
PCR
viable and dead bacteria
ISSN:1001-411X
DOI:10.3969/j.issn.1001-411X.2011.01.023