降钙素基因相关肽对MC3T3-E1成骨细胞氧化损伤的保护作用研究

目的 探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对MC3T3-E1成骨细胞氧化损伤的保护作用及其潜在机制。方法 1)构建细胞氧化损伤模型,将实验分为4组,H2O2组使用含不同浓度(10-1、10-2、10-3、10-4、10-5 mol·L^-1)H2O2的培养液,CGRP+H2O2组使用含不同浓度(10-6、10-7、10-8、10-9、10-10 mol·L^-1)CGRP的培养液预处理后再加入含10-4 mol·L^-1 H2O2的培养液,对照组为常规培养液,空白组不接种细胞。培养12、24、36、48 h后,CCK-8法检测细胞增殖活性,筛选最佳建模浓度和CGRP对成骨细胞氧化损伤的最佳保护浓度...

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Published in华西口腔医学杂志 Vol. 34; no. 6; pp. 584 - 588
Main Author 郭俊峰 张慧宇 张纲 安洋 杨阳 王飞 谭颖徽
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 第三军医大学新桥医院口腔颌面外科,重庆,400037 2016
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ISSN1000-1182
DOI10.7518/hxkq.2016.06.007

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Summary:目的 探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对MC3T3-E1成骨细胞氧化损伤的保护作用及其潜在机制。方法 1)构建细胞氧化损伤模型,将实验分为4组,H2O2组使用含不同浓度(10-1、10-2、10-3、10-4、10-5 mol·L^-1)H2O2的培养液,CGRP+H2O2组使用含不同浓度(10-6、10-7、10-8、10-9、10-10 mol·L^-1)CGRP的培养液预处理后再加入含10-4 mol·L^-1 H2O2的培养液,对照组为常规培养液,空白组不接种细胞。培养12、24、36、48 h后,CCK-8法检测细胞增殖活性,筛选最佳建模浓度和CGRP对成骨细胞氧化损伤的最佳保护浓度。2)采用含10-4 mol·L^-1 H2O2(H2O2组)、10-8 mol·L^-1 CGRP(CGRP组)的培养液和10-8 mol·L^-1 CGRP+10-4 mol·L^-1 H2O2培养液(CGRP+H2O2组)、常规培养液(对照组)培养成骨细胞,测定超氧化物歧化酶(SOD)的活性、活性氧(ROS)的含量以及炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6的水平。结果 1)在10-4 mol·L^-1 H2O2时细胞增殖开始出现抑制(P〈0.01),并呈浓度和时间依赖性;10-8 mol·L^-1 CGRP预处理后细胞增殖活性最高,与只加入10-4 mol·L^-1 H2O2有统计学差异(P〈0.01)。2)与H2O2组相比,CGRP+H2O2组SOD活性升高(P〈0.01),TNF-α、IL^-1β、IL-6水平降低(P〈0.05),ROS含量降低(P〈0.01)。结论 H2O2会对MC3T3-E1成骨细胞造成氧化损伤,CGRP对MC3T3-E1成骨细胞氧化损伤具有保护作用。
Bibliography:Objective This study aimed to observe the protective effect of calcitonin gene-related peptide (CGRP), as well as its potential mechanism, against oxidative damage in MC3T3-E1 osteoblasts. Methods 1) MC3T3-E1 osteoblasts were treated with different hydrogen peroxide (HzOz) concentrations (10-% 10-2, 10-3, 10% and 10-Smol·L^-1) for 12, 24, 36, and 48 h to build an oxidative damage model, to determine cell proliferation activity in each group by using CCK-8 assay, and to determine the optimal modeling concentration. MC3T3-E1 osteoblasts were pretreated for 1 h with different CGRP concentrations (10^-6, 10^-7, 10^-8, 10^-9, and 10^-10mol·L^-1) followed by treatment with H2O2 (10^-4 mol·L^-1). After 12, 24, 36, and 48 h, the CGRP expression and activity of osteoblasts were detected using the CCK-8 method to determine the optimal CGRP concentration that provides the best protective effect against oxidative damage. 2) Superoxide dismutase (SOD) activity, reactive oxygen species (ROS) content, and the levels of the
ISSN:1000-1182
DOI:10.7518/hxkq.2016.06.007