扶正化瘀方调节差异微小RNAs表达的抗肝纤维化的作用机制

• Published in: 临床肝胆病杂志 Vol. 32; no. 3; pp. 503 - 508
• Main Author: 王清兰 陶艳艳 吕靖 刘平 刘成海
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所,上海201203 2016; 上海中医药大学上海高校中医内科学E研究院,上海201203%上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所,上海,201203
• Subjects: 寡核苷酸序列分析; 微RNAs; 扶正化瘀方; 肝硬化; Fuzheng Huayu Recipe; 寡核苷酸序列分析; 肝硬化; MicroRNAs; 扶正化瘀方; oligonucleotide array sequence analysis; liver cirrhosis; 微RNAs
• ISSN: 1001-5256
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-5256.2016.03.022

目的筛选出扶正化瘀方（FZHY）调控的差异微小RNAs（miRNAs）,并对这些差异miRNAs进行生物功能分析,部分揭示FZHY抗肝纤维化的作用机制。方法 CCl4皮下注射制备小鼠肝纤维化模型,分为正常组、模型组及FZHY组;自造模前3 d开始给药,1次/d,共8周。天狼星红染色及羟脯氨酸（Hyp）含量测定观察肝组织胶原沉积。应用miRNAs芯片检测各组小鼠肝脏miRNAs表达谱。基于miRNAs表达谱筛选出正常组、FZHY组与模型组具有相同变化趋势的差异miRNAs,即FZHY调控的miRNAs,并以qRT-PCR进行验证。采用Target Scan及PITA数据库对miRNAs靶基因进行预测,并采用DAVID数据库对这些预测的靶基因进行功能分析及信号通路分析,发现其调控的显著性功能及信号通路。多组间比较采用方差分析,miRNA差异基因筛选采用随机方差模型的t检验。结果 FZHY可明显降低纤维化肝组织Hyp含量,减轻胶原沉积。miRNAs芯片分析共发现3个FZHY调控的miRNAs,分别为：mmu-miR-322、mmu-miR-342-3p和mmu-miR-296-5p。信号通路分析共得到32条这些miRNAs可能调控的信号通路,其中趋化因子信号通路、黏着斑、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路、肌动蛋白细胞骨架调节、间隙连接、细胞外基质蛋白相互作用、Wnt信号通路、Jak-STAT信号通路等与肝纤维化密切相关;功能富集分析共得到32项显著性功能,其中三磷酸尿苷（GTP）酶活性调节、细胞连接、凋亡调节、Ras蛋白信号转导调节及小GTP酶活性调节等与肝纤维化密切相关。结论下调miR-322,miR-342-3p及miR-296-5p表达,从而调节这些miRNAs对应的相关功能,如MAPK信号通路、Wnt信号通路、凋亡调节及Ras蛋白信号转导调节等可能是扶正化瘀方抗肝纤维化的作用机制,值得进一步研究。