不同逆转录载体系统应用于水牛胎儿成纤维细胞转基因的探索

采用2种不同的逆转录病毒载体系统（pMX和pMSCV），构建携带绿色荧光蛋白（EGFP）基因的重组载体，探索能高效感染水牛胎儿成纤维细胞（ BFFs）的病毒系统和感染方法。结果发现，2种逆转录病毒系统包装出的重组病毒滴度都能达到106，将pMX病毒系统生产的重组病毒经超速离心浓缩后，滴度可达到107；2种重组病毒都能感染BFFs，但pMX系统比pMSCV系统更能有效地感染BFFs；通过对病毒的感染方式进行比较，发现使用新鲜病毒连续感染BFFs 2次（每次间隔12 h），或者经过超速离心浓缩后的病毒感染BFFs 1次，可以显著提高感染效率。...

Full description

Saved in:
Bibliographic Details
Published in华南农业大学学报 Vol. 34; no. 4; pp. 558 - 563
Main Author 邓彦飞 刘真真 李云芳 刘庆友 罗婵 杨素芳 石德顺
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,广西南宁,530005 2013
Subjects
水牛
胎儿成纤维细胞
转基因
逆转录病毒载体
transgene
retroviral vector
转基因
buffalo
fetal fibroblast
胎儿成纤维细胞
水牛
逆转录病毒载体
Online AccessGet full text
ISSN1001-411X

Cover

More Information
Summary:采用2种不同的逆转录病毒载体系统（pMX和pMSCV），构建携带绿色荧光蛋白（EGFP）基因的重组载体，探索能高效感染水牛胎儿成纤维细胞（ BFFs）的病毒系统和感染方法。结果发现，2种逆转录病毒系统包装出的重组病毒滴度都能达到106，将pMX病毒系统生产的重组病毒经超速离心浓缩后，滴度可达到107；2种重组病毒都能感染BFFs，但pMX系统比pMSCV系统更能有效地感染BFFs；通过对病毒的感染方式进行比较，发现使用新鲜病毒连续感染BFFs 2次（每次间隔12 h），或者经过超速离心浓缩后的病毒感染BFFs 1次，可以显著提高感染效率。
Bibliography:retroviral vector; transgene; buffalo; fetal fibroblast
44-1110/S
DENG Yanfei, LIU Zhenzhen, LI Yunfang, LIU Qingyou, LUO Chan, YANG Sufang, SHI Deshun （ State Key Laboratory for Conservation and Utilization of Subtropical Agro-bioresources, Guangxi University, Nanning 530005, China）
After two retroviral systems with enhanced green fluorescent protein （ EGFP） report gene were constructed in this study , the retroviral systems and the infection method suitable for buffalo fetal fibro-blasts （BFFs） were investigated.The results revealed that the retrovirus titer of the two systems was 106, and the titer of the pMX system could be up to 10 7 after ultracentrifugation concentration .The infection efficiency of pMX retroviral system was higher than that of the pMSCV retroviral system .Using the fresh retrovirus infected BFFs twice （12 h interval） or ultracentrifugal retrovirus infected BFFs once could im-prove the infection efficiency .
ISSN:1001-411X