乌桕硬脂酰-酰基载体蛋白脱饱和酶基因的克隆及表达

硬脂酰-酰基载体蛋白脱饱和酶是植物脂肪酸合成代谢的关键酶，直接调节膜脂和贮脂中饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸的比例。本研究通过RT-PCR及RACE技术，克隆鸟桕硬脂酰-酰基载体蛋白脱饱和酶（SsSAD）的eDNA全长序列。结果显示，该序列包含1个1191bp的完整的开放阅读框（GenBank登录号为EF079655），编码396个氨基酸，含33个氨基酸的叶绿体转移肽。其成熟肽含有363个氨基酸，推测其分子量为41．5kDa，等电点为5．42。同源性分析及同源建模数据显示SsSAD和其它物种的SAD有较高的同源性，含有1个保守结构域。构建原核表达载体pMAL—SsSAD，转入大肠杆菌DH5ct，并对...

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Published in西南农业学报 Vol. 29; no. 8; pp. 1806 - 1812
Main Author 牛蓓 徐莺 宋君 郭晓恒 符佳 邹亮 陈放 高孝锦 郭静
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 成都大学医学院,四川成都,610106%四川大学生命科学学院,四川成都,610064%四川省农业科学院分析检测中心,四川成都,610066 2016
Subjects
乌桕
克隆
原核表达
生物信息学分析
硬脂酰-酰基载体蛋白脱饱和酶
乌桕
Bioinformatics analysis
克隆
Prokaryotic expression
原核表达
Sapium sebiferum
Cloning
生物信息学分析
硬脂酰-酰基载体蛋白脱饱和酶
Stearoyl-acyl carrier protein desaturase
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ISSN1001-4829
DOI10.16213/j.cnki.scjas.2016.08.009

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Summary:硬脂酰-酰基载体蛋白脱饱和酶是植物脂肪酸合成代谢的关键酶，直接调节膜脂和贮脂中饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸的比例。本研究通过RT-PCR及RACE技术，克隆鸟桕硬脂酰-酰基载体蛋白脱饱和酶（SsSAD）的eDNA全长序列。结果显示，该序列包含1个1191bp的完整的开放阅读框（GenBank登录号为EF079655），编码396个氨基酸，含33个氨基酸的叶绿体转移肽。其成熟肽含有363个氨基酸，推测其分子量为41．5kDa，等电点为5．42。同源性分析及同源建模数据显示SsSAD和其它物种的SAD有较高的同源性，含有1个保守结构域。构建原核表达载体pMAL—SsSAD，转入大肠杆菌DH5ct，并对诱导表达条件进行优化。
Bibliography:NIU Bei , XU Ying , SONG Jun , GUO Xiao-heng , FU Jia , ZHOU Liang , CHEN Fang , GAO Xiao-jin , GUO Jing （1. School of Medical, Chengdu University, Sichuan Chengdu 610106, China; 2. College of Life Science, Siehuan University, Sichuart Chengdu 610064, China; 3. Analysis and Test Center of Sichuan Academy of Agriculture Science, Sichuan Chengdu 610066, China）
Stearoyl-acyl carrier protein （stearoyl-ACP） desaturase catalyzes the first desaturation step in seed oil biosynthesis, converting stearoyl-ACP to oleoyl-ACP. It plays a key role in determining the ratio of saturated fatty acids to unsaturated fatty acids in membrane lipids and store lipids form plants. In this study, cDNA sequence of SsSAD gene was cloned by RT-PCR and RACE technology. The result showed that a full-length SsSAD gene contained an 1191 bp open reading frame （ORF） encoding 396 amino acid residues （ GenBank accession num- ber： EF079655） , which had a chloroplast transit peptide of 33 amino acids. The mature peptide contained 363 amino acids,
ISSN:1001-4829
DOI:10.16213/j.cnki.scjas.2016.08.009