大百合RAPD体系的建立与优化
以大百合DNA为模板,采用正交试验设计,对影响大百合RAPD—PCR扩增的重要参数进行了优化试验,以期建立大百合RAPD反应的优化体系。结果表明最优大百合RAPD—PCR的反应体系(20μl):Mg^2+(2.0mmol/L)1.0μl、dNTPs(0.2mmol/L).0μl、primer(0.6umol/L)).3μl、DNA(30ng/μl)1.0μl、Taq酶1U、10×buffer2μl;扩增程序为:在94℃下预变性5min,然后进行35个循环(94℃变性30s、37℃退火50s、72℃延伸1min),最后在72℃延伸10min,在电压为50V下电泳1h。...
Saved in:
| Published in | Xinan nongye xuebao Vol. 20; no. 6; pp. 1304 - 1306 |
|---|---|
| Main Author | |
| Format | Journal Article |
| Language | Chinese |
| Published |
四川农业大学农学院,四川,雅安,625014%四川农业大学林学园艺学院,四川,雅安,625014
2007
|
| Subjects | |
| Online Access | Get full text |
| ISSN | 1001-4829 |
| DOI | 10.3969/j.issn.1001-4829.2007.06.035 |
Cover
| Summary: | 以大百合DNA为模板,采用正交试验设计,对影响大百合RAPD—PCR扩增的重要参数进行了优化试验,以期建立大百合RAPD反应的优化体系。结果表明最优大百合RAPD—PCR的反应体系(20μl):Mg^2+(2.0mmol/L)1.0μl、dNTPs(0.2mmol/L).0μl、primer(0.6umol/L)).3μl、DNA(30ng/μl)1.0μl、Taq酶1U、10×buffer2μl;扩增程序为:在94℃下预变性5min,然后进行35个循环(94℃变性30s、37℃退火50s、72℃延伸1min),最后在72℃延伸10min,在电压为50V下电泳1h。 |
|---|---|
| Bibliography: | genetic diversity S664.3 Cardioctihum giganteum ; RAPD; genetic diversity; milli-Q RAPD milli-Q 51-1213/S Cardioctihum giganteum |
| ISSN: | 1001-4829 |
| DOI: | 10.3969/j.issn.1001-4829.2007.06.035 |