大百合RAPD体系的建立与优化

以大百合DNA为模板,采用正交试验设计,对影响大百合RAPD—PCR扩增的重要参数进行了优化试验,以期建立大百合RAPD反应的优化体系。结果表明最优大百合RAPD—PCR的反应体系(20μl):Mg^2+(2.0mmol/L)1.0μl、dNTPs(0.2mmol/L).0μl、primer(0.6umol/L)).3μl、DNA(30ng/μl)1.0μl、Taq酶1U、10×buffer2μl;扩增程序为:在94℃下预变性5min,然后进行35个循环(94℃变性30s、37℃退火50s、72℃延伸1min),最后在72℃延伸10min,在电压为50V下电泳1h。...

Full description

Saved in:
Bibliographic Details
Published inXinan nongye xuebao Vol. 20; no. 6; pp. 1304 - 1306
Main Author 喻晓 文涛 曾杨
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 四川农业大学农学院,四川,雅安,625014%四川农业大学林学园艺学院,四川,雅安,625014 2007
Subjects
Online AccessGet full text
ISSN1001-4829
DOI10.3969/j.issn.1001-4829.2007.06.035

Cover

More Information
Summary:以大百合DNA为模板,采用正交试验设计,对影响大百合RAPD—PCR扩增的重要参数进行了优化试验,以期建立大百合RAPD反应的优化体系。结果表明最优大百合RAPD—PCR的反应体系(20μl):Mg^2+(2.0mmol/L)1.0μl、dNTPs(0.2mmol/L).0μl、primer(0.6umol/L)).3μl、DNA(30ng/μl)1.0μl、Taq酶1U、10×buffer2μl;扩增程序为:在94℃下预变性5min,然后进行35个循环(94℃变性30s、37℃退火50s、72℃延伸1min),最后在72℃延伸10min,在电压为50V下电泳1h。
Bibliography:genetic diversity
S664.3
Cardioctihum giganteum ; RAPD; genetic diversity; milli-Q
RAPD
milli-Q
51-1213/S
Cardioctihum giganteum
ISSN:1001-4829
DOI:10.3969/j.issn.1001-4829.2007.06.035