异基因造血干细胞移植中非血缘供者KIR2DL1、KIR3DL1免疫重建规律的研究
目的在非血缘供者为杀伤细胞免疫球蛋白样受体(ⅪR).AA基因型的异基因造血干细胞移植(allo.HSCT)中研究KIR2DLl、KIR3DLl的免疫重建规律。方法采用序列特异性引物PCR、流式细胞术和实时荧光定量PCR法,对75对供受者进行KIR基因分型,确定供者均为KIR.AA基因型,并动态检测移植当天及移植后不同时间澎植后0.5个月~〈1.5个月(1个月)、移植后1.5个月~〈2.5个月(2个月)、移植后2.5个月~〈3.5个月(3个月)、移植后3.5个月~〈6.5个月(3-6个月)、移植后6.5个月~〈9.5个月(6-9个月)、移植后9.5个月〈12.5个月(9~12个月)]KIR2DL...
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Published in | 中华血液学杂志 Vol. 38; no. 8; pp. 667 - 672 |
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Main Author | |
Format | Journal Article |
Language | Chinese |
Published |
215006 苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所
2017
临床检测中心 |
Subjects | |
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ISSN | 0253-2727 |
DOI | 10.3760/cma.j.issn.0253-2727.2017.08.004 |
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Summary: | 目的在非血缘供者为杀伤细胞免疫球蛋白样受体(ⅪR).AA基因型的异基因造血干细胞移植(allo.HSCT)中研究KIR2DLl、KIR3DLl的免疫重建规律。方法采用序列特异性引物PCR、流式细胞术和实时荧光定量PCR法,对75对供受者进行KIR基因分型,确定供者均为KIR.AA基因型,并动态检测移植当天及移植后不同时间澎植后0.5个月~〈1.5个月(1个月)、移植后1.5个月~〈2.5个月(2个月)、移植后2.5个月~〈3.5个月(3个月)、移植后3.5个月~〈6.5个月(3-6个月)、移植后6.5个月~〈9.5个月(6-9个月)、移植后9.5个月〈12.5个月(9~12个月)]KIR2DLl、KIR3DLl膜蛋白和mRNA的表达水平。结果KIR2DL膜蛋白中位表达水平:非血缘供者移植当天为21.60%,受者在1、2、3、3-6个月时表达水平分别为7.40%、12.00%、16.92%、17.64%;KIR2DLl的mRNA中位表达水平:非血缘供者移植当天为265.14/10。ABL拷贝数,受者移植后1、2、3、3-6、6-9、9-12个月时表达水平分别为332.17、438.31、723.25、414.17、187.60及234.67/10。ABL拷贝数。KIR2DLl的mRNA和膜蛋白表达水平在移植后各个时间点均逐渐升高,且在3个月后达到最高,但mRNA表达水平升高早于膜蛋白。(2)KIR3DLl膜蛋白中位表达水平:非血缘供者移植当天为18.56%,受者在移植后1、2、3、3-6个月时表达水平分别为23.83%、22.57%、23.02%、21.60%;KIR3DLlmRNA中位表达水平:非血缘供者移植当天为572.29/10。ABL拷贝数,受者移植后1、2、3、3-6、6-9、9-12个月时表达水平分别为1233.74、1140.42、876.73、1057.07、739.02、514.43/10。ABL拷贝数。KIR3DLl的mRNA和膜蛋白在移植后1个月的表达水平均已超过了非血缘供者,并在移植后各个时间点均稳定高表达,且mRNA与膜蛋白表达水平同步升高。结论KIR2DLl和KIR3DLl基因移植后的免疫重建规律性不同,为在移植后选择最佳时间点定量检测KIR2DLl、KIR3DLl表达水平提供了实验依据。 |
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Bibliography: | Objective To investigate the immune reconstruct regularity profile of K1R2DL1 and KIR3DL1 in unrelated-donor allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (allo-HSCT) with KIR- AA genotype. Method 75 donor-recipient pairs were performed by KIR genotying using PCR-SSP, and all donors were identified with KIR-AA genotype. Dynamic detections (including unrelated-donor on the day of transplantation and the recipient each month post allo-HSCT) of the expression of KIR2DL1/3DL1 on NK cell and mRNA level were performed in 291 cases using flow cytometry (FCM) and real-time fluorescent quantitation PCR (RT-qPCR). Result (1)The median expression of KIR2DLI in unrelated- donor on transplant' s day was 21.60%, the median expression of KIR2DL 1 in recipient 1 M, 2M, 3M and 3- 6M after transplantation were 7.40%, 12.00%, 16.92%, 17.64% respectively. The median expression of KIR2DL1 in unrelated-donor on transplant' s day was 265.14 copies/10 000abl copies, the medianexpression of KIR2DL1 in recipient 1M, 2M, 3M, 3-6M, |
ISSN: | 0253-2727 |
DOI: | 10.3760/cma.j.issn.0253-2727.2017.08.004 |