趋化因子受体CXCR4及其配体CXCL12在肝癌侵袭转移中的作用及机制

目的 探讨趋化因子受体 CXCR4 及其配体 CXCL12 （CXCL12/CXCR4） 在原发性肝癌侵袭转移中的作用及机制.方法 分别采用 Westernblot、 免疫组化和 Real-timePCR 等方法检测 60 例肝癌及对应癌旁组织标本中CXCL12/CXCR4 蛋白及 mRNA 表达水平.常规培养 4 种肝癌细胞 （Huh7、 MHCC97h、 HepG2、 Hep3B） 和正常肝细胞（7702）, Real-timePCR 检测上述细胞中 CXCL12、 CXCR4 mRNA 的表达, 筛选合适的实验细胞.将 CXCR4 干扰质粒 （sh-CXCR4） 和对应空载体 （sh-c...

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Published in天津医药 Vol. 46; no. 1; pp. 20 - 26
Main Author 张引;余力信;张发鹏;余晓雯;王文龙;罗志强
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 南昌大学第二附属医院肝胆外科,330000 2018
Subjects
CXCR4;肿瘤细胞
培养的;细胞增殖;动物实验;血管内皮生长因子受体
肝肿瘤;趋化因子CXCL12;受体
receptors,CXCR4
动物实验
cultured
cell proliferation
受体,CXCR4
liver neoplasms
趋化因子CXCL12
肿瘤细胞,培养的
chemokine CXCL12
肝肿瘤
血管内皮生长因子受体
animal experimentation
vascular endothelial growth factor receptor
tumor cells
细胞增殖
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ISSN0253-9896
DOI10.11958/20170729

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Summary:目的 探讨趋化因子受体 CXCR4 及其配体 CXCL12 （CXCL12/CXCR4） 在原发性肝癌侵袭转移中的作用及机制.方法 分别采用 Westernblot、 免疫组化和 Real-timePCR 等方法检测 60 例肝癌及对应癌旁组织标本中CXCL12/CXCR4 蛋白及 mRNA 表达水平.常规培养 4 种肝癌细胞 （Huh7、 MHCC97h、 HepG2、 Hep3B） 和正常肝细胞（7702）, Real-timePCR 检测上述细胞中 CXCL12、 CXCR4 mRNA 的表达, 筛选合适的实验细胞.将 CXCR4 干扰质粒 （sh-CXCR4） 和对应空载体 （sh-control） 分别转染至 MHCC97h 构建稳转细胞系.Transwell 侵袭实验、 细胞划痕实验、 MTT 实验分别检测 2 组细胞的侵袭、 迁移和增殖能力.取稳定表达的 sh-control 和 sh-CXCR4 MHCC97h 细胞,接种至 6 只裸鼠皮下, 观察瘤体生长情况.Westernblot 检测 sh-control 和 sh-CXCR4 MHCC97h 细胞及对应裸鼠移植瘤中血管内皮生长因子-C （VEGF-C） 的表达, 同时对转染 CXCR 过表达质粒的 MHCC97h 中 VEGF-C 的表达水平进行检测.结果 （1） Westernblot、 免疫组化和 Real-timePCR 的结果均证实肝癌组织中 CXCL12/CXCR4 蛋白及mRNA 表达水平均高于癌旁组织.（2） Huh7、 MHCC97h、 HepG2、 Hep3B 细胞中 CXCL12/CXCR4 mRNA 表达水平均高于 7702 细胞, 选取 MHCC97h 为实验细胞.转染 sh-CXCR4 的 MHCC97h 细胞的侵袭、 迁移和增殖能力均明显低于sh-control 组, 同时接种含 sh-CXCR4 的 MHCC97h 细胞的裸鼠移植瘤的生长速度也明显小于 sh-control 组.（3） 体外和体内实验均证实 sh-CXCR4 组的 VEGF-C 表达水平均低于 sh-control 组, 而过表达 CXCR4 后, VEGF-C 的蛋白表达明显上调.结论 CXCL12/CXCR4 在原发性癌组织和肝癌细胞中呈现高表达, CXCL12/CXCR4 可能通过调控VEGF-C 蛋白表达从而抑制肝癌细胞的增殖、 侵袭和
Bibliography:12-1116/R
ISSN:0253-9896
DOI:10.11958/20170729