ブルーギル肝臓中のシステインジオキシゲナーゼ活性測定のための酵素の性状に関する研究

内部標準物質としてホモシステイン酸（HCA）を用いた OPA プレラベル-逆相 HPLC 法により，酵素反応によって生成するシステイン酸（CA）とシステインスルフィン酸（CSA）の量を測定して，ブルーギル肝臓中のシステインジオキシゲナーゼ（CDO）の性状を調べた。 HCA は，陽イオン交換カラム上を交換樹脂に吸着することなく回収され，OPA プレラベル-逆相 HPLC による分析では，CSA から少し遅れて溶出した。 一方，ブルーギルの CDO が最大の CA と CSA の生成を示す基質濃度や反応 pH は，哺乳類のそれと酷似していたが，その至適温度は27℃と低かった。また，ヒドロキシルアミ...

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Published inSuisan Zoshoku Vol. 69; no. 4; pp. 299 - 305
Main Authors 小野田, 寛, 今井, 恵子, 後藤, 孝信, 小林, 太郎, 山本, 将悟, 大矢, 虎太郎
Format Journal Article
LanguageJapanese
Published 日本水産増殖学会 2021
Online AccessGet full text
ISSN0371-4217
2185-0194
DOI10.11233/aquaculturesci.69.299

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Abstract 内部標準物質としてホモシステイン酸（HCA）を用いた OPA プレラベル-逆相 HPLC 法により，酵素反応によって生成するシステイン酸（CA）とシステインスルフィン酸（CSA）の量を測定して，ブルーギル肝臓中のシステインジオキシゲナーゼ（CDO）の性状を調べた。 HCA は，陽イオン交換カラム上を交換樹脂に吸着することなく回収され，OPA プレラベル-逆相 HPLC による分析では，CSA から少し遅れて溶出した。 一方，ブルーギルの CDO が最大の CA と CSA の生成を示す基質濃度や反応 pH は，哺乳類のそれと酷似していたが，その至適温度は27℃と低かった。また，ヒドロキシルアミンや Fe2+はアミノ酸の生成に大きく影響し，それぞれの濃度が1.0 m m と0.05 m m の時に CA と CSA の生成が最大となった。さらに Mes 緩衝液よりもリン酸緩衝液中で多くのアミノ酸が生成したが，NAD+とバソクプロインジスルホン酸は，CA と CSA の生成に影響しなかった。
AbstractList 内部標準物質としてホモシステイン酸（HCA）を用いた OPA プレラベル-逆相 HPLC 法により，酵素反応によって生成するシステイン酸（CA）とシステインスルフィン酸（CSA）の量を測定して，ブルーギル肝臓中のシステインジオキシゲナーゼ（CDO）の性状を調べた。 HCA は，陽イオン交換カラム上を交換樹脂に吸着することなく回収され，OPA プレラベル-逆相 HPLC による分析では，CSA から少し遅れて溶出した。 一方，ブルーギルの CDO が最大の CA と CSA の生成を示す基質濃度や反応 pH は，哺乳類のそれと酷似していたが，その至適温度は27℃と低かった。また，ヒドロキシルアミンや Fe2+はアミノ酸の生成に大きく影響し，それぞれの濃度が1.0 m m と0.05 m m の時に CA と CSA の生成が最大となった。さらに Mes 緩衝液よりもリン酸緩衝液中で多くのアミノ酸が生成したが，NAD+とバソクプロインジスルホン酸は，CA と CSA の生成に影響しなかった。
内部標準物質としてホモシステイン酸(HCA)を用いたOPAプレラベル-逆相HPLC法により，酵素反応によって生成するシステイン酸(CA)とシステインスルフィン酸(CSA)の量を測定して，ブルーギル肝臓中のシステインジオキシゲナーゼ(CDO)の性状を調べた。HCAは，陽イオン交換カラム上を交換樹脂に吸着することなく回収され，OPAプレラベル-逆相HPLCによる分析では，CSAから少し遅れて溶出した。一方，ブルーギルのCDOが最大のCAとCSAの生成を示す基質濃度や反応pHは，哺乳類のそれと酷似していたが，その至適温度は27℃と低かった。また，ヒドロキシルアミンやFe2+はアミノ酸の生成に大きく影響し，それぞれの濃度が1.0mMと0.05mMの時にCAとCSAの生成が最大となった。さらにMes緩衝液よりもリン酸緩衝液中で多くのアミノ酸が生成したが，NAD+とバソクプロインジスルホン酸は，CAとCSAの生成に影響しなかった。
Author 大矢, 虎太郎
小野田, 寛
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後藤, 孝信
山本, 将悟
小林, 太郎
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PublicationDecade 2020
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– reference: Stipanuk, M. H. (2004) Role of the liver in regulation of body cysteine and taurine levels: a brief review. Neurochem. Res., 29, 105-110.
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