ブルーギル肝臓中のシステインジオキシゲナーゼ活性測定のための酵素の性状に関する研究

• Published in: Suisan Zoshoku Vol. 69; no. 4; pp. 299 - 305
• Main Authors: 小野田, 寛, 今井, 恵子, 後藤, 孝信, 小林, 太郎, 山本, 将悟, 大矢, 虎太郎
• Format: Journal Article
• Language: Japanese
• Published: 日本水産増殖学会 2021
• ISSN: 0371-4217; 2185-0194
• DOI: 10.11233/aquaculturesci.69.299

内部標準物質としてホモシステイン酸（HCA）を用いた OPA プレラベル-逆相 HPLC 法により，酵素反応によって生成するシステイン酸（CA）とシステインスルフィン酸（CSA）の量を測定して，ブルーギル肝臓中のシステインジオキシゲナーゼ（CDO）の性状を調べた。 HCA は，陽イオン交換カラム上を交換樹脂に吸着することなく回収され，OPA プレラベル-逆相 HPLC による分析では，CSA から少し遅れて溶出した。 一方，ブルーギルの CDO が最大の CA と CSA の生成を示す基質濃度や反応 pH は，哺乳類のそれと酷似していたが，その至適温度は27℃と低かった。また，ヒドロキシルアミンや Fe2+はアミノ酸の生成に大きく影響し，それぞれの濃度が1.0 m m と0.05 m m の時に CA と CSA の生成が最大となった。さらに Mes 緩衝液よりもリン酸緩衝液中で多くのアミノ酸が生成したが，NAD+とバソクプロインジスルホン酸は，CA と CSA の生成に影響しなかった。