魚介類中の腸炎ビブリオ定量のためのMPN-PCR法の評価
腸炎ビブリオと Vibrio alginolyticus を接種した魚介類および自然汚染魚介類について，易熱性ヘモリシン遺伝子(tlh)を標的としたMPN-PCR法とアルカリペプトン水(APW)増菌およびTCBS培養の組合せによるMPN法(MPN-TCBS法) により腸炎ビブリオ菌数を測定した．MPN-TCBS法ではTCBS培地上に発育したV. alginolyticus などの影響により腸炎ビブリオの分離が困難となる例が見られた．一方MPN-PCR法は，腸炎ビブリオを分離する必要なくAPWからtlh 遺伝子を検出することが可能であったことから，魚介類，特に腸炎ビブリオ以外の菌が多数TCBS培...
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| Published in | Shokuhin eiseigaku zasshi Vol. 44; no. 6; pp. 289 - 293 |
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| Main Authors | , , , , , |
| Format | Journal Article |
| Language | Japanese |
| Published |
公益社団法人 日本食品衛生学会
2003
|
| Online Access | Get full text |
| ISSN | 0015-6426 1882-1006 |
| DOI | 10.3358/shokueishi.44.289 |
Cover
| Abstract | 腸炎ビブリオと Vibrio alginolyticus を接種した魚介類および自然汚染魚介類について，易熱性ヘモリシン遺伝子(tlh)を標的としたMPN-PCR法とアルカリペプトン水(APW)増菌およびTCBS培養の組合せによるMPN法(MPN-TCBS法) により腸炎ビブリオ菌数を測定した．MPN-TCBS法ではTCBS培地上に発育したV. alginolyticus などの影響により腸炎ビブリオの分離が困難となる例が見られた．一方MPN-PCR法は，腸炎ビブリオを分離する必要なくAPWからtlh 遺伝子を検出することが可能であったことから，魚介類，特に腸炎ビブリオ以外の菌が多数TCBS培地上に発育する検体では，MPN-TCBS法により腸炎ビブリオの菌数測定に適していると考えられた． |
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| AbstractList | 腸炎ビブリオとVibrio alginolyicusを接種した魚介類および自然汚染魚介類について、易熱性ヘモリシン遺伝子（lh）を標的としたMPN-PCR法とアルカリペプトン水（APW）増菌およびCBS培養の組合せによるMPN法（MPN-CBS法）により腸炎ビブリオ菌数を測定した。MPN-CBS法法ではCBS培地上に発育したV.alginolyicusなどの影響により腸炎ビブリオの分離が困難となる例が見られた。一方MPN-PCR法は、腸炎ビブリオを分離する必要なくAPWからlh遺伝子を検出することが可能であったことから、魚介類、特に腸炎ビブリオ以外の菌が多数CBS培地上に発育する検体では、MPN-CBS法により腸炎ビブリオの菌数測定に適していると考えられた。 腸炎ビブリオと Vibrio alginolyticus を接種した魚介類および自然汚染魚介類について，易熱性ヘモリシン遺伝子(tlh)を標的としたMPN-PCR法とアルカリペプトン水(APW)増菌およびTCBS培養の組合せによるMPN法(MPN-TCBS法) により腸炎ビブリオ菌数を測定した．MPN-TCBS法ではTCBS培地上に発育したV. alginolyticus などの影響により腸炎ビブリオの分離が困難となる例が見られた．一方MPN-PCR法は，腸炎ビブリオを分離する必要なくAPWからtlh 遺伝子を検出することが可能であったことから，魚介類，特に腸炎ビブリオ以外の菌が多数TCBS培地上に発育する検体では，MPN-TCBS法により腸炎ビブリオの菌数測定に適していると考えられた． |
| Author | 増田, 高志 西尾, 智裕 有田, 世乃 川森, 文彦 三輪, 憲永 秋山, 眞人 |
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| PublicationTitle | Shokuhin eiseigaku zasshi |
| PublicationTitleAlternate | 食品衛生学雑誌 |
| PublicationYear | 2003 |
| Publisher | 公益社団法人 日本食品衛生学会 |
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| References | 10) Hara-Kudo, Y., Nishina, T., Nakagawa, H., Konuma, H., Hasegawa, J., Kumagai, S., Improved method for detection of Vibrio parahaemolyticus in seafood. Appl. Environ. Microbiol., 67, 5819-5823 (2001). 11) Hara-Kudo, Y., Sugiyama, K., Nishina, T., Saitoh, A., Nakagawa, H., Ichihara, T., Konuma, H., Hasegawa, J., Kumagai, S., Detection of TDH-producing Vibrio parahaemolyticus O3 : K6 from naturally contaminated shellfish using an immunomagnetic separation method and a chromogenic agar medium. Kansensyougaku Zasshi (Jpn. J. Infect. Dis.), 75, 955-960 (2001). 2) Janda, J. M., Powers, C., Bryant, R. G., Abbott, S. L., Current perspectives on the epidemiology and pathogenesis of clinically significant Vibrio spp. Clin. Microbiol. Rev., 1, 245-267 (1988). 5) Mantynen, V., Niemela, S., Kaijalainen, S., Pirhonen, T., Lindstrom, K., MPN-PCR-quantification method for staphylococcal enterotoxin c1 gene from fresh cheese. Int. J. Food Microbiol., 36, 135-143 (1997). 3) Sakazaki, R., Nakanishi, H., Control of food poisoning with Vibrio parahaemolyticus. Shokuhin Eisei Kenkyu (Food Sanitation Res.), 27(6), 21-26 (1977). 8) Taniguchi, H., Ohta, H., Ogawa, M., Mizuguchi, Y., Cloning and expression in Escherichia coli of Vibrio parahaemolyticus thermostable direct hemolysin and thermolabile hemolysin genes. J. Bacteriol., 162, 510-515 (1985). 1) Food and Drug Administration, Bacteriological Analytical Manual, 8th ed. Chapter 9. AOAC International, Gaithersburg, USA (1998). 9) Bej, A. K., Patterson, D. P., Brasher, C. W., Vickery, M. C. L., Jones, D. D., Kaysner, C. A., Detection of total and hemolysin-producing Vibrio parahaemolyticus in shellfish using multiplex PCR amplification of tl, tdh and trh. J. Microbiol. Methods, 36, 215-225 (1999). 7) Alam, M. J., Tomochika, K., Miyoshi, S., Shinoda, S., Environmental investigation of potentially pathogenic Vibrio parahaemolyticus in the Seto-Island Sea, Japan. FEMS Microbiol. Lett., 208, 83-87 (2002). 4) Picard, C., Ponsonnet, C., Paget, E., Nesme, X., Simonet, P., Detection and enumeration of bacteria in soil by direct DNA extraction and polymerase chain reaction. Appl. Environ. Microbiol., 58, 2717-2722 (1992). 6) Miwa, N., Nishina, T., Kubo, S., Atsumi, M., Most probable number method combined with nested polymerase chain reaction for detection and enumeration of enterotoxigenic Clostridium perfringens in intestinal contents of cattle, pig and chicken. J. Vet. Med. Sci., 59, 89-92 (1997). |
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